敲减Blimp1基因表达对CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型早期肝损伤的保护作用

作     者：秦秋实 李蕊 周妍希 张玥 韩铭 朱鏐娈 

作者机构：北京大学地坛医院教学医院传染病研究所 首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所新发突发传染病研究北京市重点实验室 北京市感染性疾病研究中心 

出 版 物：《北京大学学报(医学版)》 (Journal of Peking University(Health Sciences))

年 卷 期：2025年

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81871586、81671940) 

主　　题：肝纤维化 肝损伤 动物模型 B淋巴细胞诱导成熟蛋白1 

摘      要：目的：探讨敲减转录因子B淋巴细胞诱导成熟蛋白1（B lymphocyte induced maturation protein 1， Blimp1）基因对四氯化碳(carbon tetrachloride， CCl4)诱导的小鼠肝纤维化模型早期肝损伤的保护作用。方法：采用C57BL/6小鼠腹腔注射5%（体积分数）CCl4橄榄油溶液制备肝纤维化小鼠模型，采用小鼠腹腔注射短发夹RNA （short hairpin RNA， shRNA）腺相关病毒（adeno-associated virus， AAV）敲减Blimp1基因表达。将小鼠随机分为3组，空白实验组（n=10），无意义RNA对照组（n=10）和Blimp1敲减组（n=10）。CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型制备27 d后取材，通过Western blot和real-time PCR检测小鼠肝组织Blimp1蛋白、α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin， α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（collagen type Ⅰ alpha 1， COL1A1）、III型胶原蛋白（collagen type III alpha 1， COL3A1）及其mRNA表达水平；测定各组小鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase， AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine transaminase， ALT）水平；采用苏木素-伊红染色、Masson染色和天狼星红染色法鉴定小鼠肝组织的病理变化及肝纤维化程度。结果：与空白实验组相比，无意义RNA对照组小鼠肝脏Blimp1蛋白表达水平显著升高（2.036±0.244， t=3.690， P=0.002），Blimp1敲减组小鼠Blimp1蛋白表达降低至基础水平（0.783±0.249， t=6.223， P=0.003）。与无意义RNA对照组小鼠血清ALT [（1 957.8±633.6） U/L]和AST [（1 808.8±260.1） U/L]相比，Blimp1敲减组小鼠血清ALT [（894.0±360.1） U/L， t=3.998， P=0.003]和AST [（820.0±100.6） U/L， t=6.141， P=0.004]水平均显著降低，肝组织炎性细胞浸润减少、纤维化程度减轻，肝脏α-SMA（0.676±0.064， t=7.930， P=0.001）、COL1A1（1.426±0.143， t=6.364， P=0.003）、COL3A1（1.124±0.198， t=3.440， P=0.026）蛋白表达水平降低，且mRNA表达与蛋白水平变化一致。结论：Blimp1在CCl4诱导的小鼠肝纤维化中发挥重要作用，敲减Blimp1表达有利于保护小鼠的早期肝损伤。