天麻素注射液对高糖诱导的足细胞增殖、迁移和上皮-间质转化的影响及分子机制研究

作     者：马医林 李锴 赵芳芳 MA Yilin;LI Kai;ZHAO Fangfang

作者机构：陕西省汉中市人民医院内分泌肾病科陕西汉中723000 

出 版 物：《检验医学与临床》 (Laboratory Medicine and Clinic)

年 卷 期：2025年第22卷第1期

页      面：18-23页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家卫生健康委员会“十四五”规划重点课题(YYWS9499) 

主　　题：糖尿病肾病 人肾小球足细胞 高糖 天麻素注射液 增殖 迁移 Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3 上皮-间质转化 

摘      要：目的 探讨天麻素注射液(GI)对高糖(HG)诱导的糖尿病肾病(DN)人肾小球足细胞(HGPC)增殖、迁移及上皮-间质转化(EMT)进程的影响,以及分析GI是否通过调控蛋白Janus激酶(JAK)2/信号转导和转录激活因子(STAT)3信号通路而发挥作用。方法 通过含30 mmol/L D-葡萄糖的培养基刺激HGPC建立HG损伤模型作为HG组,同时将体外培养的HGPC细胞分为对照组(Con组,不做干预),不同浓度GI组(10、20、30、40μmol/L GI组)进行预实验,通过细胞活力实验筛出最佳作用浓度作为GI组进行后续实验。后续实验将细胞分为6组,分别是Con组(不做干预)、HG组(加入30 mmol/L D-葡萄糖处理)、GI组(加入最佳作用浓度的GI处理)、JAK2/STAT3信号通路抑制剂(AG490)组(加入30 mmol/L D-葡萄糖+40μmol/L AG490处理)、GI+AG490组(加入30 mmol/L D-葡萄糖+最佳作用浓度的GI+40μmol/L AG490处理)、GI+JAK2/STAT3信号通路激活剂(C-A1)组(加入30 mmol/L D-葡萄糖+最佳作用浓度的GI+20μmol/L C-A1),每组干预时间均为24 h。采用细胞计数试剂盒检测HGPC活力;采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷法检测HGPC增殖能力;通过Transwell小室实验检测HGPC迁移能力;采用蛋白免疫印迹法检测HGPC中EMT相关蛋白及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白水平。结果 20μmol/L GI组、30μmol/L GI组、40μmol/L GI组细胞活力均高于HG组(P0.05),且20μmol/L GI组效果最好,因此后续实验选用20μmol/L作为GI的最佳作用浓度。与Con组相比,HG组细胞迁移数和p-JAK2、p-STAT3、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白水平均明显升高(P0.05),细胞增殖率和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白水平均降低(P0.05);GI组、AG490组细胞迁移数和p-JAK2、p-STAT3、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白水平均低于HG组(P0.05),细胞增殖率和E-cadherin蛋白水平均高于HG组(P0.05);与GI组相比,GI+AG490组细胞迁移数和p-JAK2、p-STAT3、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白水平均降低(P0.05),细胞增殖率和E-cadherin蛋白水平均升高(P0.05);与GI组相比,GI+C-A1组细胞迁移数和p-JAK2、p-STAT3、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白水平均升高(P0.05),细胞增殖率和E-cadherin蛋白水平均降低(P0.05)。结论 GI可以通过抑制JAK2/STAT3的磷酸化来抑制HGPC的迁移及EMT进程,促进细胞增殖。