ERA结合的胶体金侧流层析快速和灵敏检测鹦鹉热衣原体

作     者：邹林涛 宋宇琪 罗格妙 周璇 邓仲良 

作者机构：南华大学衡阳医学院公共卫生学院 

出 版 物：《微生物学通报》 (Microbiology China)

年 卷 期：2025年

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：湖南省自然科学基金(2022JJ30501) 湖南省大学生创新训练项目(230XCX202) 病原微生物生物安全国家重点实验室开放研究基金资助项目(SKLPBS2437) 

主　　题：酶促重组等温扩增技术 鹦鹉热衣原体 胶体金侧流层析试纸条 

摘      要：【背景】鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci， Cps)是一种重要的人畜共患病病原体，可引起鹦鹉热，若该病未能得到及时诊断和治疗，将会危及患者生命健康。【目的】建立一种基于酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification， ERA)结合胶体金侧流层析技术的快速检测鹦鹉热衣原体的方法。【方法】以鹦鹉热衣原体主要外膜蛋白(major outer membrane protein， MOMP)基因保守序列为靶标，设计特异性引物和探针。通过优化反应体系中的探针浓度、孵育温度和反应时间等关键参数，建立ERA结合胶体金侧流层析检测方法。评估该方法的灵敏度与特异性，并使用49份临床生物样本进行方法验证。【结果】该方法在37℃条件下，15 min内可检测出最低10 copies/μL的鹦鹉热衣原体DNA。特异性测试表明，该方法仅对鹦鹉热衣原体呈阳性反应，对其他4种相关呼吸道病原体均无交叉反应。与qPCR方法相比较，在49份临床样本的检验中该方法灵敏度为94.7% (36/38)、特异度为100% (11/11)、阴性预测值为84.6% (11/13)、阳性预测值为100% (36/36)、Kappa值为0.89。结果显示该方法具有良好的临床应用前景。【结论】本研究建立的ERA结合胶体金侧流层析方法操作简便、无需特殊仪器设备，能够快速、灵敏地检测鹦鹉热衣原体。该方法为鹦鹉热衣原体的快速诊断提供了新的技术支持，适用于资源有限的实验室和现场检测。