人参皂苷Rg3对脂多糖诱导的胶质细胞-神经元互作损伤模型的保护作用

作     者：蔡星宇 杨道锋 卓雪瑞 孙一鸣 CAI Xingyu;YANG Daofeng;ZHUO Xuerui;SUN Yiming

作者机构：蚌埠医科大学临床医学院蚌埠233030 蚌埠医科大学药学院蚌埠233030 蚌埠医科大学第一附属医院药剂科蚌埠233004 蚌埠医科大学临床药学教研室蚌埠233004 

出 版 物：《四川大学学报(医学版)》 (Journal of Sichuan University(Medical Sciences))

年 卷 期：2024年第55卷第6期

页      面：1543-1549页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(No.82104152) 蚌埠医学院大学生创新项目(No.S202310367122)资助 

主　　题：人参皂苷Rg3 胶质细胞-神经元互作损伤模型 脂多糖 凋亡 

摘      要：目的探究人参皂苷Rg3对脂多糖诱导的胶质细胞-神经元互作损伤模型的保护作用。方法培养原代小胶质细胞及HT-22细胞株,实验分为对照组(Control,CON)、100 ng/mL LPS组(LPS)、炎症模型组(CM)、人参皂苷Rg3组、炎症模型组+人参皂苷Rg3(CM+Rg3),其中Rg3剂量分别为2.5、5、10和20μmol/L。CM组和CM+Rg3组制备胶质细胞-神经元互作模型。通过免疫荧光检测原代小胶质细胞纯度,CCK-8检测各组HT-22细胞活力,ELISA试剂盒检测各组细胞样本中炎性细胞因子〔白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和IL-10〕的水平变化。ROS试剂盒检测细胞氧化损伤程度,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达,Caspase-3酶活试剂盒检测各组细胞Caspase-3酶活性。结果培养的小胶质细胞纯度达95%以上,可用于后续实验。不同剂量的人参皂苷Rg3刺激后HT-22存活率与CON组相差不大,100 ng/mL LPS刺激后神经元细胞存活率为98%,表明Rg3和LPS对神经元细胞的存活率无影响。与CON组相比,CM组HT-22细胞存活率降低(P0.01),与CM组相比,CM+Rg3组神经细胞存活率增加(P0.01),表明胶质细胞-神经元互作模型制作成功。其中Rg3剂量为10μmol/L时,CM+Rg3组HT-22细胞存活率最高(P0.05),因此选择10μmol/L Rg3用于后续实验。100 ng/mL LPS刺激后,HT-22细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10浓度与CON组差异无统计学意义。100 ng/mL LPS刺激后,小胶质细胞IL-1β、TNF-α的浓度高于CON组(P0.05),但LPS+Rg3组IL-1β、TNF-α的浓度低于LPS组(P0.05)。CM+Rg3组活性氧浓度比CON略高,但低于CM组(P0.01)。CM+Rg3组Bax的表达比CON高,低于CM组;Bcl-2表达比CON组低,高于CM组(P0.01)。CM组Caspase-3酶活性高于CON组(P0.01);CM+Rg3组Caspase-3酶活性低于CM组(P0.01)。结论人参皂苷Rg3可能通过调控胶质细胞损伤,减少炎症因子的分泌,抑制神经元的凋亡,发挥缓解神经元凋亡的作用。