微小RNA干扰Bcl-2相关抗凋亡基因2抑制蛋白酶体抑制剂对甲状腺癌细胞凋亡诱导作用的研究

作     者：都镇先 张海燕 邓娓娓 王华芹 DU Zhen-xian;ZHANG Hai-Yan;DENG Wei-wei;WANG Hua-qin

作者机构：中国医科大学附属第一医院内分泌科辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院老年病科辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院生化与分子生物教研室辽宁沈阳110001 

出 版 物：《中华肿瘤防治杂志》 (Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment)

年 卷 期：2010年第17卷第16期

页      面：1241-1243,1261页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30870522) 辽宁省教育厅资助项目(2009A765) 

主　　题：甲状腺肿瘤 RNA Bcl-2相关抗凋亡基因2 蛋白酶体抑制剂 细胞凋亡 

摘      要：目的:探讨微小RNA干扰Bcl-2相关抗凋亡基因2(BAG2)对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用的影响。方法:选取人甲状腺未分化癌细胞系FRO,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组、特异性siBAG2组和随机序列核酸siRNA组;利用微小RNA干扰技术降低BAG2的表达;采用RT-PCR法、蛋白质印迹法分别检测各组细胞BAG2mR-NA及蛋白表达;采用分光光度法测定Caspases-3活性;采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:与空白对照组相比,MG132显著增加FRO细胞系中BAG2基因表达水平(P0.01),并呈时间依赖效应;与空白对照组和随机序列核酸siR-NA组相比,siBAG2处理组中BAG2mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.01),其凋亡率及Caspases-3活性显著降低,P0.01。结论:蛋白酶体抑制剂能够上调甲状腺未分化癌细胞系FRO中BAG2基因的表达水平,siBAG2具有特异性降低BAG2基因表达的作用,同时抑制蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用。