达卡气单胞菌gabT基因缺失株的构建及生物学特性分析

作     者：杨晨露 王雪倩 高海波 吴堉锟 叶帅 刘钟涛 冯伟 王梦奇 郭桂英 范丽霞 杨诺 李雪松 郑继平 

作者机构：海南大学生命健康学院 东方和旺鑫养殖有限公司 海南大学One Health协同创新中心 海南大学化学化工学院 海南大学OneHealth协同创新中心 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2025年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金地区项目(32360879) 海南大学科研启动费项目(海南省重要动物疫病高效诊断试剂研发及其产业化) 海南省重点研发项目(ZDYF2024SHFZ142) 东方市国家现代农业产业园创建重点项目(鳄鱼种苗育繁推示范中心) 海南省研究生创新科研课题(Qhys2023-189,Qhys2023-186,Qhyb2023-63和Qhys2024-51) 

主　　题：达卡气单胞菌 gabT基因 基因敲除 生物学特性 

摘      要：为了探究gabT基因对达卡气单胞菌生物学特性的影响，本研究以同源重组法构建该基因缺失株和回补株。以达卡气单胞菌基因组DNA为模板，PCR扩增gabT基因的上、下游同源臂，回收产物经重组反应连接pRE112后，转化至大肠杆菌WM3064感受态细胞，提取重组质粒pRE112-ΔgabT，经同源重组反应与抗生素筛选得到达卡气单胞菌ΔgabT缺失株，并构建其回补株CΔgabT。经PCR鉴定和测序结果显示，构建出达卡气单胞菌ΔgabT缺失株和回补株CΔgabT的相关序列与目的片段一致。生物学特性分析试验结果表明gabT的缺失导致达卡气单胞菌生物被膜形成能力下降（P≤0.05）、运动性降低（P≤0.01）、对H2O2敏感性增强（P≤0.05）。达卡气单胞菌的缺失株ΔgabT的成功构建，为进一步研究达卡气单胞菌gabT基因的功能奠定了基础。