吸入毒性评价体外连续流暴露系统的评价及应用

作     者：李银霞 盛云华 胡玥 唐黎明 LI Yin-xia;SHENG Yun-hua;HU Yue;TANG Li-ming

作者机构：复旦大学药学院上海201203 中国医药工业研究总院上海201210 上海市食品药品检验研究院上海201203 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2025年第41卷第2期

页      面：391-398页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 100405[医学-卫生毒理学] 0710[理学-生物学] 1006[医学-中西医结合] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 071007[理学-遗传学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：上海市科学技术委员会“科技创新行动计划”(No 19DZ2202700) 

主　　题：气液界面暴露 连续流暴露系统 沉积量 孔间均一性 柠檬烯 Calu-3细胞 

摘      要：目的评价体外气液界面(ALI)连续流暴露系统,为吸入毒理学体外研究提供参考数据,并用此系统结合Calu-3细胞ALI培养模型对化合物柠檬烯的吸入毒性进行初步评价。方法荧光素钠(Na-flu)剂量法辅以石英微量天平法(QCM)来评估ALI连续流暴露系统的沉积量和孔间均一性;采用ALI连续流暴露系统将柠檬烯气溶胶暴露于ALI培养的Calu-3细胞模型3 h,暴露剂量为高、中、低(0.213、0.104、0.0645μg·cm^(-2)),洁净空气暴露作为阴性对照组,24 h后检测暴露后细胞的活性、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、跨上皮电阻值(TEER)、黏蛋白MUC5AC与炎症因子基因表达,来评价柠檬烯的吸入毒性。 结果 ALI连续流暴露系统荧光素钠的沉积量为(0.085±0.007) μg/30 min/孔,在经过多次调试后,孔间均一性从最初的26%优化至10%以下;与对照组相比,柠檬烯气溶胶暴露后细胞活性以及 IL-8 基因表达无明显变化、细胞 IL-6 基因表达上升;中暴露剂量的柠檬烯促使细胞释放LDH10%、细胞肿瘤坏死因子 TNF-α 基因表达下降;高暴露剂量的柠檬烯降低细胞TEER值,损害细胞屏障功能、细胞黏蛋白 MUC5AC 基因表达增加。 结论 ALI连续流暴露系统调试过后可以用于吸入毒性体外研究;高、中暴露剂量的柠檬烯具有吸入毒性。