蛋白激酶C抑制剂对苏尼替尼所致心脏毒性的保护作用

作     者：邱素华 章华 顾盼 师晨霞 马景涛 许彦芳 QIU Su-hua;ZHANG Hua;GU Pan;SHI Chen-xia;MA Jing-tao;XU Yan-fang

作者机构：河北医科大学药理教研室河北省新药药理毒理重点实验室教育部血管与神经生物重点实验室河北石家庄050017 河北医科大学第四医院心内科河北石家庄050011 

出 版 物：《河北医科大学学报》 (Journal of Hebei Medical University)

年 卷 期：2025年第46卷第1期

页      面：5-13页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：河北省自然科学基金精准医学联合基金重点项目(H2020206554) 

主　　题：蛋白激酶C抑制剂 苏尼替尼 心脏毒性 

摘      要：目的在细胞和整体动物水平探讨蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂对苏尼替尼(Sunitinib,SU)引发心脏毒性的保护作用。方法新生大鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVMs)在不同浓度的SU(1,5,10μmol/L)中进行孵育,检测细胞三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)。然后观察非选择性PKC抑制剂(bisindolylmaleimide 1,Bis-1)、选择性新型PKC抑制剂(Rotterlin)或抑制肽对SU引发心肌细胞毒性的影响。雄性C57小鼠随机分为4组,即正常对照组、SU组、SU+PKC抑制剂白屈菜红碱(chelerythrine,CHE)低剂量(0.375 mg·kg^(-1)·d^(-1))及CHE高剂量(0.75 mg·kg^(-1)·d^(-1))组。连续灌胃SU同时腹腔注射CHE,给药3周后取心脏组织,提取线粒体,检测心肌细胞线粒体呼吸链复合物Ⅳ和Ⅴ活性;电镜观察心肌细胞线粒体结构变化;Western blot检测各组心肌磷酸化PKC亚型包括PKCα、PKCε以及PKCδ的表达情况。结果SU孵育NRVMs后呈浓度与时间依赖性减少ATP含量、增加LDH释放量、降低线粒体膜电位。非选择性PKC抑制剂Bis-1可预防SU引发的上述改变;选择性新型PKC抑制剂Rotterlin和新型PKCε抑制肽亦可预防SU引起的上述各项指标的变化。小鼠给予SU后,心肌细胞线粒体呼吸链复合物Ⅳ和Ⅴ的活性均显著下降,电镜显示,心肌细胞线粒体出现明显肿胀、嵴融合等形态改变;同时给予不同剂量的CHE后,线粒体呼吸链复合物Ⅳ和Ⅴ的活性均显著升高,电镜结果显示,CHE明显减轻SU所致线粒体形态改变。Western检测显示,SU组心肌磷酸化PKCε表达量显著升高,而磷酸化PKCδ、PKCα表达量则无明显变化;高剂量的CHE显著抑制了磷酸化PKCε的过表达,使其恢复至对照组水平。结论PKC抑制剂对SU导致的心脏毒性具有显著保护作用,此作用可能源于抑制新型PKC(主要是PKCε亚型)的过度激活。