SARS-CoV-2假病毒感染hACE2转基因小鼠的模型建立及评价

作     者：张天宇 吴振起 李晓芳 杨馥语 王语馨 

作者机构：辽宁中医药大学第一临床学院 辽宁中医药大学附属第二医院 沈阳市中医外感病实验室 

出 版 物：《中华中医药学刊》 (Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2025年

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81373687 81874490 82074494) 

主　　题：SARS-CoV-2假病毒 K18-hACE2小鼠 动物模型 刺突蛋白 

摘      要：目的 采用含有刺突蛋白（spike，S）质粒和表达Luciferase荧光素酶和GFP荧光蛋白的新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）假病毒感染K18-hACE2转基因小鼠，探索建立并评价一种可用的动物模型，为后续有效药物靶点筛选提供基础。方法 （1）将12只K18-hACE2转基因小鼠随机分为对照组和模型组，模型组小鼠通过移液器滴鼻50 μL 1×109PFU/只的病毒液，对照组小鼠予等量空载体病毒液，（2）于造模后第3天观察小鼠Luciferase活体荧光检测后取材；荧光显微镜下观察肺组织GFP荧光强度；光镜下观察小鼠肺组织病理切片；透射电镜观察肺组织超微结构；qPCR法检测肺组织S蛋白表达；ELISA法检测血清中白介素6（interleukin 6，IL-6）、白介素10（interleukin 10，IL-10）含量；Western Blot法检测肺组织血管紧张素转换酶2（angiotensin converting enzyme 2，ACE2）蛋白表达。结果 （1）活体成像可观察到模型组小鼠鼻咽部及双肺有较大荧光面积，肺组织冷冻切片中可见大量绿色荧光，肺组织病理切片及超微结果观察可见病理改变，对照组小鼠肺内未见荧光表达及病理改变；（2）模型组小鼠肺内可见S蛋白mRNA表达（P 0.01）；（3）与对照组小鼠相比，模型组小鼠血清中IL-6表达升高，IL-10表达降低（P 0.01）；（4）与对照组小鼠相比，模型组小鼠肺组织中的ACE2受体含量下降 （P 0.01）。结论 本项研究建立并评价了一种SARS-CoV-2假病毒感染hACE2转基因小鼠的模型，模型的优化研究仍需后续进一步完善。