一种黄龙病快速高通量检测方法的建立及应用

作     者：袁琴 李智鹏 王铁霖 董霆 杨玉文 关巍 赵廷昌 YUAN Qin;LI Zhi-peng;WANG Tie-lin;DONG Ting;YANC Yu-wen;CUAN Wei;ZHAO Ting-chang

作者机构：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害综合治理全国重点实验室北京100193 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2025年第50卷第7期

页      面：1735-1740页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基　　金：国家重点研发计划项目(2021YFD1400800) 中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP) 

主　　题：陈皮 黄龙病 碱裂解法 TaqMan qPCR检测 

摘      要：芸香科植物橘Citrus reticulata及其栽培变种的干燥成熟果皮可作为常用的传统中药材,称为陈皮,有着丰富的营养成分和药用价值,具有止咳祛痰、健脾燥湿、保肝益胃、补气安神的作用。黄龙病(Huanglongbing)是柑橘生产中具毁灭性的一种病害,严重威胁着柑橘产业的发展。黄龙病可引起芸香科植物果实无法正常成熟、树势逐渐衰弱直至死亡等症状,对陈皮的产量和品质造成严重威胁。由于黄龙病菌在感病植物体中的分布十分不均匀,因此准确检测黄龙病菌需要大量采集植物样品进行检测。目前传统提取方法和商业化提取试剂盒的样品前处理方法耗时长、步骤多,严重增加了黄龙病诊断的难度和工作量,成为黄龙病检测工作的瓶颈。该研究利用碱裂解法结合TaqMan qPCR的方法建立了一套快速高通量的检测技术,能够在5 min内完成多个样品的前处理,整个检测可在45 min内完成,检测限为6.67 fg·μL^(-1)。使用碱裂解法与商用试剂盒对田间采集的柑橘样品进行平行检测,检测结果无显著差异。该研究建立的样品前处理方法具有成本低、操作简单、效率高的特点,结合TaqMan qPCR可为黄龙病早期及现场诊断提供技术支持。同时对柑橘产业的病害防控具有重要意义,有助于提升柑橘类药材的产量与品质。