虾肝肠胞虫类泛素蛋白EhUBL的原核表达与亚细胞定位

作     者：谭念秋 魏春梅 文钰凇 范晓东 周泽扬 TAN Nianqiu;WEI Chunmei;WEN Yusong;FAN Xiaodong;ZHOU Zeyang

作者机构：重庆师范大学生命科学学院、动物生物学重庆市重点实验室重庆401331 西南大学微孢子虫感染与防控重庆市重点实验室重庆400715 

出 版 物：《重庆师范大学学报(自然科学版)》 (Journal of Chongqing Normal University:Natural Science)

年 卷 期：2024年第41卷第6期

页      面：43-53页

学科分类：0710[理学-生物学] 0908[农学-水产] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(No.32372944) 重庆市技术创新与应用示范项目(No.cstc2018jscx-msybX0313) 重庆市教育委员会科学技术研究计划青年项目(No.KJQN201900516) 重庆市教育委员会中小学创新人才培养工程项目(No.CY230503) 重庆师范大学基金项目(No.22XLB023) 

主　　题：虾肝肠胞虫 泛素化 UBL(ubiqutin-like)-UBA(ubiquitin associated)结构域 原核表达 亚细胞定位 

摘      要：为明确虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)类泛素蛋白家族成员EhUBL的序列特征和定位情况,利用Expasy、WegoLoc、Interpro等在线软件对EhUBL的序列特征和空间结构进行预测分析,通过对它的编码基因EhUBL进行克隆、原核表达以获得EhUBL重组蛋白(rEhUBL),并制备特异性多克隆抗体anti-EhUBL,再通过免疫电镜探查EhUBL的亚细胞定位情况。结果显示:1)EhUBL全长873 bp,编码292个氨基酸;EhUBL的预测相对分子质量为31.38 kDa,该蛋白分子拥有UBL(ubiqutin-like)-UBA(ubiquitin associated)结构域。2)EhUBL与黄道蟹肠胞虫(Enterospora canceri)假定蛋白ECANGB1_154和毕氏肠胞虫(Enterocytozoon bieneusi)假定蛋白EBI_25559的亲缘关系较近。3)通过基因克隆和原核表达成功获得了rEhUBL,并制备了anti-EhUBL。4)EhUBL主要分布在虾肝肠胞虫孢子的胞壁及细胞核中。上述结果为EhUBL的功能研究奠定基础,为虾肝肠胞虫的防控提供了新靶标。