基于TMT标记定量蛋白质组学技术研究中药复方益糖康治疗糖尿病肾脏疾病的作用机制

作     者：李凌谊 于嘉祥 张瀚文 石岩 王一霖 吴怡 程玥凤 郑广新 张文顺 

作者机构：辽宁中医药大学 辽宁省中医药研究院/辽宁中医药大学附属第二医院 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2025年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：2023年辽宁省应用基础研究计划项目(2023JH2/101300094) 辽宁省科技厅博士科研启动课题(2023-BS-141) 辽宁省科技厅联合基金项目(2023-MSLH-184) “中医脏象理论及应用”教育部重点实验室开放基金(zyzx2402) 

主　　题：益糖康 糖尿病肾脏疾病 TMT标记定量蛋白质组学 自噬 

摘      要：目的：观察中药复方益糖康（YTK）对糖尿病肾脏疾病（DKD）的治疗效果，并进一步研究其作用机制。方法：选取16周龄雄性SPF级db/db小鼠45只，随机分为模型组、YTK高剂量组、YTK中剂量组、YTK低剂量组、非奈利酮组；另取db/m小鼠9只作为空白组。各治疗组按照相应剂量灌胃，持续给药8周后进行取材。通过各组小鼠尿液、血清相应指标，脾、胰腺、肾脏组织病理变化的结果作为DKD模型评价及YTK的疗效评价，运用TMT标记定量蛋白质组学技术筛选其可能的作用机制，选取LAMP2A、LC3-II和NLRP3蛋白进行免疫荧光检测以验证TMT组学结果。结果：与空白组相比，模型组尿液UACR、NGAL，血清NGAL，血清Cre-s、UA和UREA含量均显著升高，肾组织出现明显的病理变化，与DKD相似，是良好的DKD模型。经YTK干预后，上述指标及病理变化均有明显改善。通过TMT标记定量蛋白质组学技术筛选提示：YTK是通过调控自噬、氨基酰-tRNA生物合成、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢等通路发挥作用的。免疫荧光检测自噬相关蛋白结果提示：与空白组相比，模型组LAMP2A、LC3-II蛋白表达量显著下降，NLRP3蛋白表达量显著升高，经YTK干预后，LAMP2A、LC3-II蛋白表达量显著升高，NLRP3蛋白表达量显著下降。结论：YTK能有效改善血糖指标、降低蛋白尿、延缓DKD进程，其作用与调控自噬有关，但调控自噬的具体机制有待于进一步深入探讨。