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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:天津科技大学生物工程学院、工业发酵微生物教育部重点实验室天津300457
出 版 物:《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)
年 卷 期:2025年第41卷第1期
页 面:474-485页
核心收录:
学科分类:080801[工学-电机与电器] 0808[工学-电气工程] 08[工学] 0805[工学-材料科学与工程(可授工学、理学学位)] 080502[工学-材料学]
基 金:国家自然科学基金(32101902) 天津市自然科学基金(22JCQNJC00560) 天津市合成生物技术创新能力提升行动项目(TSBICIP-KJGG-009)
主 题:黄素单加氧酶 酶学性质 S-甲基-L-半胱氨酸 S-甲基-L-半胱氨酸亚砜 金属离子
摘 要:S-甲基-L-半胱氨酸亚砜(S-methyl-L-cysteine sulfoxide,SMCO)是一种具有多种功能特性的非蛋白质含硫氨基酸。目前关于催化S-甲基-L-半胱氨酸(S-methyl-L-cysteine,SMC)生物合成SMCO的酶鲜有报道。本研究将栗酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)来源的黄素单加氧酶基因(spfmo)通过大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)进行异源表达,并对其酶学性质进行了分析。重组SpFMO的最适催化条件为30℃、pH 8.0,该条件下比酶活为72.77 U/g;此外,适当的Mg2+可以提高SpFMO的酶活;经酶动力学分析,该酶对底物SMC的酶促反应动力学参数Km值为23.89μmol/L,催化效率kcat/Km为61.71 L/(min·mmol)。在最适条件下,SpFMO催化SMC在9 h内生成SMCO的产率为12.31%。本研究为酶法合成SMCO提供了一定参考。