非洲猪瘟病毒蛋白pS183L的原核表达及多克隆抗体制备

作     者：余群 邹艳丽 陈欢 刘珊 苗雨润 任炜杰 王振忠 何佳依 高晓宇 钱莺娟 吴晓东 郑龙三 YU Qun;ZOU Yanli;CHEN Huan;LIU Shan;MIAO Yurun;REN Weijie;WANG Zhenzhong;HE Jiayi;GAO Xiaoyu;QIAN Yingjuan;WU Xiaodong;JUNG Yongsam

作者机构：南京农业大学动物医学院/教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室/农业农村部细菌学重点实验室江苏南京210095 中国动物卫生与流行病学中心/国家非洲猪瘟参考实验室山东青岛266000 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2025年第57卷第2期

页      面：112-117页

学科分类：090602[农学-预防兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划资助项目(2021YFD1801200) 江苏省重点研发计划(现代农业)重点项目(SBE2020310346) 

主　　题：非洲猪瘟病毒 pS183L 多克隆抗体 

摘      要：旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pS183L的多克隆抗体。根据公布的毒株ASFV China/2018/Anhui XCGQ基因序列设计引物,酶切连接法构建重组质粒pET-28a-S183L;经鉴定成功的质粒转化大肠杆菌Rosetta,诱导表达后经镍柱亲和层析纯化后获得重组蛋白pS183L,免疫小鼠并制备抗pS183L的多克隆抗体。通过ELISA鉴定多克隆抗体效价大于1∶128000;Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)表明,该多克隆抗体能识别293T和PK15细胞外源表达蛋白及ASFV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)内源表达蛋白。综上,本研究成功制备抗pS183L多克隆抗体,为深入研究ASFV pS183L的功能提供了关键生物材料。