抑制组蛋白脱乙酰酶3通过Th17促进小鼠银屑病的发展

作     者：许帆 张辛瑞 夏阳晨 李文婷 陈昊 秦安琪 张爱红 朱依然 田枫 郑全辉 

作者机构：华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室 北京大学医学部实验动物科学部 华北理工大学附属医院重症医学科 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress in Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2025年

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100206[医学-皮肤病与性病学] 10[医学] 

基　　金：河北省卫健委(20190105) 国家自然科学基金(81373111)资助项目 

主　　题：组蛋白去乙酰化酶3 IL-17 银屑病 CCR8 

摘      要：目的 探讨组蛋白脱乙酰酶3（histone deacetylase 3，HDAC3）对小鼠银屑病样炎症发生发展及免疫机制的影响。方法 选取6～8周龄健康C57BL/6小鼠，将小鼠随机分为对照组（Control）， 银屑病模型组（IMQ）， HDAC3抑制剂RGFP966处理的银屑病模型组（IMQ+RGFP966）， 提前1 d对小鼠进行剃毛处理。待稳定1 d后，Control组涂抹等量的凡士林，IMQ 组背部涂抹咪喹莫特（imiquimod，IMQ，62.5 mg/d），建立小鼠银屑病样炎症模型；IMQ+RGFP966 组在银屑病模型基础上以高剂量 HDAC3 选择性抑制剂 RGFP966（30 mg/kg）进行干预处理。各组持续处理5 d，观察记录背部皮肤银屑病样炎症症状（鳞屑、红斑、皮肤厚度）、体重变化及精神状态，并拍照存档。在小鼠解剖后，采用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色检测RGFP966对银屑病模型小鼠皮肤组织层次结构的影响，并测量皮肤厚度；通过实时荧光定量 PCR（reverse transcription real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）和蛋白质印迹法（Western blot，WB），分别检测皮肤组织中 HDAC3的mRNA和蛋白质表达水平；采用流式细胞术检测各组小鼠外周血和淋巴结中性粒细胞、外周血CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞及外周血CD4+T淋巴细胞分泌的白介素-17A（interleukin-17A，IL-17A）、脾脏CD4+T淋巴细胞HDAC3、CC基序趋化因子受体6（CC motif chemokine receptor 6，CCR6）、CC基序趋化因子受体8（CC motif chemokine receptor 8，CCR8）表达及分泌的IL-17A水平；采用免疫组化检测皮肤HDAC3、IL-17A、白介素-10（interleukin-10，IL-10）水平。结果 与Control组相比，IMQ组小鼠展示出明显的银屑病样炎症，出现红斑、鳞屑及皮肤褶皱。RGFP966加重了银屑病样炎症症状，皮肤角化增多。银屑病面积与严重性指数（psoriasis area and severity index，PASI）皮肤症状评分，IMQ组高于Control，IMQ+RGFP966组高于IMQ组。测量各组皮肤厚度，IMQ+RGFP966IMQControl。Control、IMQ、IMQ+RGFP966组的血液和淋巴结的中性粒细胞依次增多，血液CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞也呈相同趋势。在皮肤组织中，与Control组相比，模型组HDAC3的mRNA和蛋白质水平下降，RGFP966未能使HDAC3的mRNA和蛋白质表达进一步下降。HDAC3主要定位于细胞核内，与Control组相比，IMQ组的皮肤组织核内HDAC3减少，RGFP966使核内HDAC3进一步减少。与Control组和IMQ组相比，RGFP966处理使脾脏CD4+和CD8+T细胞HDAC3表达下降。RGFP966 处理增加了脾脏 CD4+T细胞CCR6和CCR8的表达；同时，外周血和脾脏CD4+T淋巴细胞的IL-17A分泌显著升高。此外，与IMQ组相比，RGFP966减少了皮肤组织IL-10蛋白并上调了IL-17A表达。结论 RGFP966通过抑制HDAC3，增加细胞因子IL-17A分泌和趋化因子CCR8、CCR6的表达，加重银屑病样炎症反应。