艾纳香沙罗泰里啶还原酶BbSAR基因的克隆与原核表达分析

作     者：梁琳 欧颜颜 孙雯雯 孔德静 何叶子 庞玉新 鞠志刚 

作者机构：贵州中医药大学药学院 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2025年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：贵州省创新型“千层次”人才项目(ZQ2018004)资助 

主　　题：艾纳香 沙罗泰里啶还原酶 基因克隆 生物信息学分析 原核表达 

摘      要：艾纳香是一种多年生木质草本，常绿灌木植物，是贵州十大苗药之一。生物碱是一类重要的天然有机化合物，作为天然中草药的重要有效成分，具有很高的研究价值。沙罗泰里啶还原酶(salutaridine reductase， SAR)在生物碱类化合物生物合成途径中起重要作用。本研究以艾纳香沙罗泰里啶还原酶(BbSAR)为研究对象，通过PCR获得该基因全长，对该基因进行生物信息学分析，并构建pET32a-BbSAR原核表达载体，在大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达BbSAR重组蛋白。结果显示，BbSAR基因的完整开放阅读框长891 bp，共编码296个氨基酸；生物信息学分析结果显示BbSAR为非跨膜蛋白，无信号肽；含有1个NADB＿Rossmann Super family保守结构域；BbSAR与菊科植物雪莲果(Smallanthus sonchifolius)聚在同一分支，氨基酸一致度为87.16%。原核表达载体pET32a-BbSAR在大肠杆菌BL21 (DE3)中成功表达出BbSAR重组蛋白，pET32a-BbSAR重组蛋白最佳诱导条件为25 ℃、16 h、0.8 mmol/L IPTG。本研究为黔产艾纳香中生物碱类化合物的合成研究奠定基础，进而提高艾纳香药用价值，同时为进一步分析沙罗泰里啶还原酶基因的功能提供分子基础。