肿瘤内革兰氏阴性菌对肺癌细胞死亡影响的初步探究

作     者：张慧洁 翟蒙恩 蒋建利 荆琳 ZHANG Huijie;ZHAI Meng'en;JIANG Jianli;JING Lin

作者机构：空军军医大学基础医学院陕西西安710032 空军军医大学第一附属医院心血管外科陕西西安710032 空军军医大学国家分子医学转化中心/基础医学院细胞生物学教研室陕西西安710032 

出 版 物：《现代肿瘤医学》 (Journal of Modern Oncology)

年 卷 期：2025年第33卷第2期

页      面：194-198页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：肿瘤内微生物 肺癌 细胞死亡 受体相互作用蛋白激酶3 

摘      要：目的:探讨肺癌组织内革兰氏阴性菌对肺癌细胞死亡的影响。方法:在体外用不同浓度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(0μg/mL、0.01μg/mL、0.1μg/mL、1μg/mL)处理肺癌细胞,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)或Western blot检测受体相互作用蛋白激酶3(receptor interacting protein kinase 3,RIPK3)表达。利用TargetScan数据库预测可能调控RIPK3的microRNA,通过双荧光素酶报告基因实验与Western blot验证预测的microRNA与RIPK3的靶向关系。用0.01μg/mL浓度的LPS处理肺癌细胞,通过RT-qPCR检测miR-637表达水平。用LPS和/或顺铂(DDP)处理肺癌细胞,通过Western blot检测PARP与切割的PARP(cl-PARP)的表达。结果:与对照组比较,LPS(0.01μg/mL)组细胞中RIPK3的表达在mRNA及蛋白水平均显著上调(P0.05和P0.001)。双荧光素酶报告基因实验显示,与miR-18a-3p、miR-18b-3p、miR-223-3p、miR-342-3p或miR-874-3p组相比,miR-637组较NC组荧光素酶活性显著降低(P0.01)。Western blot结果显示,与NC组相比,miR-637 mimics组细胞RIPK3表达显著下调(P0.05);与inhibitor NC组相比,miR-637 inhibitor组细胞RIPK3表达显著上升(P0.01)。与对照组比较,LPS(0.01μg/mL)组细胞中miR-637表达显著下调(P0.05)。与对照组比较,顺铂组与LPS+顺铂组中均可检测到PARP蛋白的切割,但LPS+顺铂组中被切割的PARP蛋白显著减少。结论:肿瘤中革兰氏阴性菌LPS的少量刺激可通过抑制miR-637的表达上调肿瘤细胞中死亡相关分子RIPK3的表达,但对顺铂诱导的肿瘤细胞凋亡具有抑制作用。