通络益智方通过PERK介导的内质网应激途径减轻大鼠血管性痴呆模型记忆缺陷的实验研究

作     者：薛大力 张晓哲 王慧 马冠峰 郭素鹏 XUE Dali;ZHANG Xiaozhe;WANG Hui;MA Guanfeng;GUO Supeng

作者机构：邢台医学高等专科学校第二附属医院神经内科河北邢台054000 邢台医学高等专科学校第二附属医院检验科河北邢台054000 邢台医学高等专科学校河北邢台054000 

出 版 物：《现代检验医学杂志》 (Journal of Modern Laboratory Medicine)

年 卷 期：2025年第40卷第1期

页      面：17-23页

学科分类：10[医学] 

基　　金：河北省医学科学研究课题计划(20242376) 

主　　题：血管性痴呆 通络益智方 内质网应激 

摘      要：目的 观察自拟通络益智方对血管性痴呆(VD)大鼠记忆缺陷及内质网应激(ERS)的影响及其机制。方法 将50只SPF级Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型组、通络益智方(TLYZF)低剂量(12.5 mg/kg/d)组、TLYZF中剂量(25 mg/kg/d)组和TLYZF高剂量(50 mg/kg/d)组,每组10只。除Sham组外,其他组大鼠采用改良双侧颈总动脉结扎法构建VD模型。TLYZF干预4周后,采用Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力;苏木素-伊红染色检测海马病理结构;尼氏染色检测海马神经元损伤;原位末端转移酶标记染色检测海马神经元凋亡;酶联免疫吸附试验检测海马组织炎性因子含量;蛋白免疫印迹法检测海马组织细胞凋亡及ERS相关蛋白的表达。结果 与Sham组比较,模型组大鼠平均逃逸潜伏期延长,穿越平台次数减少(t=14.059,8.534),海马神经元排列紊乱、形态模糊、胞质空泡化、胞核固缩、炎性细胞浸润增多,尼氏体数量减少(t=17.131),神经元凋亡率升高(t=17.701),TNF-α,IL-1β和IL-6含量增多(t=6.541,6.957,10.014),Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)、葡萄糖调控蛋白78(GRP78)、磷酸化内质网激酶(p-PERK/PERK)、磷酸化真核细胞起始因子2α(p-eIF2α)/eIF2α,激活转录因子4(ATF4)和转录因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达增多(t=13.548~76.468),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达降低(t=39.691),差异具有统计学意义(均P0.05)。与模型组比较,TLYZF治疗后大鼠平均逃逸潜伏期缩短(t=2.476,7.266,11.306),穿越平台次数增多(t=2.187,4.471,6.932),海马神经元相对规则、细胞核清晰、炎性细胞浸润明显减少,尼氏体含量增加(t=4.359,9.477,11.449),神经元凋亡率降低(t=3.631,6.145,7.580),TNF-α,IL-1β和IL-6含量减少(t=2.382~8.293),Bax(t=4.696,16.250,20.250),cleaved caspase-3(t=15.205,27.000,26.833),GRP78(t=5.918,13.139,13.741),p-PERK/PERK(t=13.416,14.230,17.889),p-eIF2α/eIF2α(t=20.152,39.346,50.750),ATF4(t=12.093,24.395,22.946)和CHOP蛋白(t=21.592,19.207,22.136)表达降低,Bcl-2蛋白表达增多(t=7.474,20.761,35.350),差异具有统计学意义(均P0.05),且高剂量组治疗效果最佳。结论 自拟通络益智方可减轻VD大鼠海马神经元凋亡和炎症损伤,其作用机制可能与抑制PERK介导的ERS有关。