METTL16靶点调控小分子化合物根皮素和EGCG对HIV-1复制的抑制作用

作     者：李政 胡小鹏 褚洁梅 安三奇 梁浩 LI Zheng;HU Xiaopeng;CHU Jiemei;AN Sanqi;LIANG Hao

作者机构：广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心广西艾滋病防治研究重点实验室广西南宁市530021 

出 版 物：《广西医学》 (Guangxi Medical Journal)

年 卷 期：2024年第46卷第12期

页      面：1815-1821页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主　　题：人类免疫缺陷病毒1型 甲基转移酶样蛋白16 N6⁃甲基腺苷修饰 小分子化合物 根皮素 表没食子儿茶素没食子酸酯 

摘      要：目的探讨甲基转移酶样蛋白16(METTL16)靶点调控小分子化合物根皮素和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对HIV⁃1复制的影响。方法(1)采用高通量计算机生物信息筛选技术筛选出与METTL16靶点相关的两种小分子化合物,即根皮素和EGCG。(2)利用非小细胞肺癌细胞A549对化合物进行初筛实验。将A549细胞分为空白组(仅含培养基)、对照组(含培养基和A549细胞)、实验组(含培养基、A549细胞、20μmol/L根皮素/EGCG),干预24 h后采用CCK⁃8法测定各组A549细胞的相对活性。(3)将MT⁃2细胞和TZM⁃bl细胞分为空白组(含培养基)、对照组(含培养基、细胞)、实验组(含培养基、细胞、5种浓度根皮素/EGCG)。干预24 h后,通过ATP荧光定量分析法来检测活细胞数量。(4)将MT⁃2细胞和TZM⁃bl细胞分为阴性对照组(未感染病毒且未干预)、阳性对照组、实验组。在阳性对照组、实验组中,通过感染HIV⁃189.6构建HIV⁃189.6/TZM⁃bl模型、HIV⁃189.6/MT⁃2模型。染毒后,在实验组TZM⁃bl细胞中立即加入5种浓度根皮素或EGCG,在实验组MT⁃2细胞中立即加入5种浓度根皮素。通过检测荧光素酶报告基因的表达来评估各组细胞中相对病毒水平。结果(1)实验组A549细胞的相对活性低于对照组(P80%;在1.25μmol/L、2.5μmol/L的根皮素干预下,实验组TZM⁃bl细胞的相对活性均80%;在5种浓度的EGCG干预下,实验组TZM⁃bl细胞的相对活性80%。(3)与阳性对照组比较,在10μmol/L、20μmol/L根皮素干预下的实验组MT⁃2细胞上清液中相对病毒水平降低,在5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L根皮素干预下的实验组TZM⁃bl细胞中的相对病毒水平降低,在5种浓度EGCG干预下的实验组TZM⁃bl细胞中的相对病毒水平均降低(P2.064、2.078;EGCG在HIV⁃189.6/TZM⁃bl模型中的治疗指数3.587。结论根皮素和EGCG可能通过调节甲基化转移酶中的METTL16靶点来调控N6⁃甲基腺苷修饰,从而抑制宿主细胞中HIV⁃1的感染和复制。