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miR-let-7a-5p靶向调控SNAP23影响食管鳞状细胞癌发展的研究

miR-let-7a-5p targeted regulation of SNAP23 and malignant progression of esophageal squamous cell carcinoma

作     者:陈娇 刘清 黄丛改 郑树涛 刘涛 卢晓梅 CHEN Jiao;LIU Qing;HUANG Conggai;ZHENG Shutao;LIU Tao;LU Xiaomei

作者机构:新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆乌鲁木齐830011 西南医科大学附属医院病理科四川泸州646000 新疆医科大学第一附属医院检验科新疆乌鲁木齐830011 

出 版 物:《癌变.畸变.突变》 (Carcinogenesis,Teratogenesis & Mutagenesis)

年 卷 期:2025年第37卷第1期

页      面:63-71页

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金(82260568) 新疆维吾尔自治区“天山英才”培养计划科技创新领军人才项目(2022TSYCLJ0031) 新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目(2022D01D69) 新疆医科大学研究生创新创业项目(CXCY2024007) 

主  题:食管鳞状细胞癌 miR-let-7a-5p 突触体相关蛋白23 侵袭转移 靶向治疗 

摘      要:目的:探讨微小RNA miR-let-7a-5p靶向调控突触体相关蛋白23(SNAP23)影响食管鳞状细胞癌(ESCC)发展的机制。方法:在人类癌症差异表达的miRNA数据库(dbDEMC)中分析了食管癌组织和癌旁正常组织中miR-let-7a-5p的表达水平,在人类癌症miRNA的交互式分析和可视化数据库(CancerMIRNome)中,采用Kaplan-Meier生存曲线及对数秩检验探讨了食管癌组织中miR-let-7a-5p的表达水平与患者预后之间的关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测人永生化食管上皮细胞SHEE和ESCC细胞系中miR-let-7a-5p的表达;利用慢病毒载体转染技术,构建miR-let-7a-5p过表达的稳定转染细胞株;分别采用EdU细胞增殖实验、集落形成实验检测细胞增殖情况;细胞划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭。在dbDEMC和CancerMIRNome数据库中分析miR-let-7a-5p在食管癌患者外周血中的表达情况。在ENCORI、Diana Tarbase、miRDB数据库寻找miR-let-7a-5p的下游靶基因。Western blot法检测SNAP23蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因实验分析miR-let-7a-5p和SNAP23的靶向关系。结果:在食管癌组织中,miR-let-7a-5p的表达水平较癌旁正常组织降低,其表达水平与患者总生存期呈正相关(HR=0.57,P0.05)。与人永生化食管上皮细胞SHEE相比,ESCC细胞系中miR-let-7a-5p呈低表达(P0.01)。与对照组相比,增强miR-let-7a-5p表达后,ESCC细胞系TE-13的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力均受到抑制(P0.05或P0.01)。在ESCC患者的外周血中,miR-let-7a-5p的表达水平较健康对照组增加(P0.01)。分泌蛋白SNAP23被预测出是miR-let-7a-5p的下游靶基因。过表达miR-let-7a-5p后SNAP23的蛋白表达水平下降(P0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-let-7a-5p可下调野生型-SNAP23的相对荧光素酶活性(P0.01)。结论:miR-let-7a-5p通过靶向下调SNAP23的表达,抑制ESCC的恶性生物学行为。

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