基于CB2/NOX4/NLRP3途径肾必宁颗粒对IgAN大鼠作用机制

作     者：卜继常 宋纯东 段凤阳 郭婷 张博 张霞 丁樱 任献青 翟文生 

作者机构：河南中医药大学第一附属医院儿科医院 河南中医药大学儿科医学院 

出 版 物：《辽宁中医杂志》 (Liaoning Journal of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2025年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(82074493) 河南省中医药学科领军人才项目(编号:豫卫中医函(2021)8号) 河南省卫健委国家中医临床研究基地科研专项(编号:2022JDZX003) 河南省中医药科学研究重大专项(编号:2023ZYZD02) 河南省“双一流”创建工程(HSRP-DFCTCM-2023-3-07) 

主　　题：IgA肾病 肾必宁 内源性大麻素受体2 NADPH氧化酶4 NOD样受体蛋白3 

摘      要：目的：基于激活内源性大麻素受体2（Cannabinoid receptor2，CB2），抑制NADPH氧化酶4（NADPH oxidase4，NOX4）/NOD样受体蛋白3（NOD-like receptor protein3，NLRP3）通路探讨肾必宁颗粒对IgA肾病（Immunoglobulin A nephropathy，IgAN）大鼠的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠适应性喂养一周后，从57只随机抽取9只为空白组，造模组48只，采用“BSA+CCl4+LPS联合造模法制备IgAN的动物模型，将成功造模的大鼠随机分为模型组（12只），泼尼松组(12只，醋酸泼尼松6.25mg·kg-1·d-1)，肾必宁等剂量组(12只，肾必宁颗粒4.1g·kg-1·d-1)，肾必宁高剂量组(12只，20.5g·kg-1·d-1)，模型组与空白组予等量生理盐水，灌胃持续4周。大鼠处死前留取尿液、血液、肾脏及结肠。采用酶标法检测尿红细胞定量（Urine red blood cell ，URB）、24小时尿总蛋白（24-hour urine total protein，24hUTP）及肝肾功能；HE染色观察肾组织与结肠组织病理变化；Western Blot检测肾、结肠CB2、NOX4、NLRP3蛋白水平；免疫荧光法观察肾脏组织IgA沉积。结果：模型组大鼠白蛋白（Albumin， ALB）降低明显，丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase， ALT）、血肌酐（Serum creatine， SCr）、血尿素氮（Blood usea nitrogen，BUN）、24hUTP、URBC水平明显升高，结肠及肾脏CB2、NOX4、NLRP3蛋白水平明显升高，与空白组比较，差异具有统计学意义（P0.05）；肾必宁治疗两组大鼠ALB升高，ALT、SCr、BUN、24hUTP、URBC水平降低，结肠组织及肾组织CB2蛋白上调，NOX4、NLRP3蛋白下调，对比模型组，具有显著差异（P0.05）。HE染色显示：模型组结肠组织炎症明显，肾脏损伤较重。与模型组比较，肾必宁等剂量、高剂量治疗组大鼠结肠结肠炎症减轻，肾脏病理改善。免疫荧光观察模型组系膜区IgA沉积较强，与模型组对比，肾必宁等剂量、高剂量治疗组系膜区IgA沉积减少。结论：肾必宁可通过改善IgAN大鼠结肠炎症、升高CB2表达，抑制NOX4/NLRP3，减少IgA肾脏沉积，进而改善上述生化指标、减轻肾脏病理损伤。