参附注射液通过抑制铁死亡发挥对缺氧缺血性脑损伤的保护作用

作     者：张晓彤 张萌 李刚 胡阳 荀雅静 丁会 沈栋林 吴铭 Zhang Xiaotong;Zhang Meng;Li Gang;Hu Yang;Xun Yajing;Ding Hui;Shen Donglin;Wu Ming

作者机构：徐州医科大学第一临床医学院徐州221000 徐州医科大学附属医院口腔科徐州221000 徐州医科大学第二临床医学院徐州221000 徐州医科大学附属医院儿科徐州221000 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2025年第60卷第1期

页      面：31-40页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

基　　金：江苏省卫生健康委员会科研项目(编号:H2019004) 江苏省研究生科研与实践创新计划(编号:KYCX22_2911) 江苏省大学生创新创业计划(编号:202010313048Y) 

主　　题：缺氧缺血性脑损伤 铁死亡 氧化应激 氧糖剥夺 参附注射液 小胶质细胞 

摘      要：目的观察缺氧缺血时脑组织损伤情况及使用参附注射液(SFI)后的病理改变、铁死亡相关因子的表达,探讨SFI通过抑制铁死亡发挥对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用机制。方法构建SD大鼠HIBD模型,并用SFI进行干预。HE染色观察脑组织病理改变;尼氏染色观察神经元存活情况;Western blot、免疫组织化学、免疫荧光法检测脑组织谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、二价金属离子转运蛋白1(DMT1)的表达;试剂盒检测还原型谷胱甘肽(GSH)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及组织铁含量。体外培养小鼠小胶质细胞系(BV2),分为对照(Ctrl)组、氧糖剥夺(OGD)组、铁死亡诱导(Erastin)组、铁死亡抑制(Fer-1)组、SFI组、Erastin+SFI组,2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)活性氧(ROS)荧光探针检测ROS释放水平;免疫荧光染色观察细胞内GPX4、DMT1表达。结果与Sham组相比,HIBD组大鼠脑组织中出现明显的神经细胞受损,GPX4表达下降(P0.01),DMT1表达升高(P0.01),GSH与SOD含量下降(P0.01),LDH、MDA及组织铁含量上升(P0.05,P0.05,P0.01);而SFI干预后,与Sham组相比,GPX4表达升高(P0.01),DMT1表达下降(P0.01),GSH与SOD含量升高(P0.01),LDH、MDA及组织铁含量降低(P0.05,P0.05,P0.01)。BV2细胞实验显示:与Ctrl组相比,OGD组ROS含量明显升高且GPX4荧光强度表达明显下降、DMT1荧光强度上升(P0.01);与OGD组相比,SFI组ROS含量降低,同时GPX4的表达升高,DMT1的表达降低(P0.01)。结论新生HIBD大鼠海马及皮质区损伤严重,GPX4表达下降、DMT1表达升高,提示铁死亡参与新生大鼠HIBD脑损伤,而SFI通过减少铁的聚集,减少ROS的产生,对HIBD实验动物模型和BV2细胞损伤模型具有保护作用。