多配体蛋白聚糖2和4在HP-PRRSV感染猪肺MVECs中作用的研究

作     者：李汉奇 傅业全 胡格 张倩 董虹 孙健 张涛 

作者机构：北京农学院动物医学院兽医学(中医药)北京市重点实验室 北京农业职业学院动物科技学院 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2025年第6期

页      面：838-846页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：北京市自然科学基金项目(6242008) 国家自然科学基金项目(32273050) 畜牧产业技术系统北京市畜牧创新团队项目(BAIC05-2024) 

主　　题：猪繁殖与呼吸综合征病毒 微血管内皮细胞 中性粒细胞 多配体蛋白聚糖 内皮屏障 

摘      要：为了解多配体蛋白聚糖（SDC）在猪肺微血管内皮细胞（MVECs）中的表达及其在高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）感染中的作用，采用免疫组织化学方法检测PRRSV感染仔猪肺组织和体外培养猪肺MVECs中SDC-2和SDC-4的表达，MVECs经SDC-2和SDC-4抗体预封闭处理后，再以HPPRRSV HN株感染，采用Western-blot法检测细胞内PRRSV N蛋白的表达水平，通过细胞划痕试验评估MVECs迁移能力，测定跨内皮单层电阻（TEER）和辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（HRP-SA）的渗漏性，以分析MVECs单层的通透性，采用Transwell法检测中性粒细胞跨MVECs单层的迁移能力。结果显示，在PRRSV感染仔猪肺组织和HP-PRRSV HN株感染的体外培养猪肺MVECs中，SDC-2和SDC-4的表达均明显增加；通过特异性抗体阻断SDC-2和SDC-4后，HP-PRRSV HN株在MVECs内复制水平显著降低。同时，病毒感染诱导的MVECs迁移率下降被显著抑制，TEER显著下降，MVECs单层对HRP-SA的渗漏显著增加，中性粒细胞跨MVECs单层迁移率显著下降。结果表明，猪肺MVECs组成型表达SDC-2和SDC-4,HP-PRRSV感染可显著上调其表达水平，它们在HP-PRRSV感染致MVECs迁移性、屏障功能和中性粒细胞外渗的变化中发挥重要作用。