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基于HPLC-MS/MS的闷黄时间和泡茶时间对藤茶中NAD+前体含量的影响分析

Effects of Yellowing Time and Tea-Making Time on NAD+Precursor Content in Vine Tea Based on HPLC-MS/MS

作     者:吴佩玲 戚舜尧 何国浩 许利嘉 肖培根 WU Peiling;QI Shunyao;HE Guohao;XU Lijia;XIAO Peigen

作者机构:中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 

出 版 物:《中国现代中药》 (Modern Chinese Medicine)

年 卷 期:2025年第27卷第1期

页      面:52-59页

学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基  金:中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2022-I2M-2-002) 广西科技基地和人才专项(桂科AD22080012) 

主  题:藤茶 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸前体 高效液相色谱-质谱法 

摘      要:目的:建立高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定藤茶Ampelopsis grossedentata(***.)***中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))及其前体化合物色氨酸(TRY)、烟酸(NA)、烟酰胺(NAM)、烟酰胺单核苷酸(NMN)和烟酰胺核苷(NR)的含量,探究闷黄时间和泡茶时间对藤茶中NAD^(+)前体含量的影响。方法:采用HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);以乙腈(A)-含0.2%甲酸和0.01 mol·L^(-1)甲酸铵的水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1);柱温为35℃;进样量为2μL;电喷雾离子源,多反应监测模式。对提取溶剂的组成进行了优化,以水-甲醇(1∶1)提取效率最高。结果:所开发的方法线性关系良好,r均大于0.999,定量限为0.02~15.00 ng·mL^(-1);加样回收率为94%~101%,加样回收率RSD为2.5%~7.3%,精密度、基质效应、准确度和稳定性均符合定量分析的要求。对不同闷黄时间(3、4、5、6 h)、不同提取时间(90℃提取30、60 min)、不同部位(茎和叶)的藤茶样品中NAD^(+)前体含量进行测定,结果表明藤茶含有丰富的NAD^(+)前体,NA、NR、NMN、NAM、NAD^(+)、TRY质量分数分别为(2.27±0.02)、(3.19±0.12)、(3.02±0.15)、(7.98±0.45)、(124.58±7.23)、(259.00±10.00)μg·g^(-1);随着闷黄时间的增加,NA、NR、NMN和NAD^(+)含量有减少的趋势,NAM和TRY含量有增加的趋势;与泡茶30 min组比较,泡茶60 min组的NAM显著增多,NMN显著减少。NAD^(+)前体在鲜叶中的分布较多,但在鲜茎中的分布较少。结论:藤茶有望成为天然来源的NAD^(+)前体膳食补充剂。

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