基于微滴式数字PCR定量牛肉中的鸭源性成分

作     者：马小玉 徐慧丽 王正亮 俞晓平 Ma Xiaoyu;Xu Huili;Wang Zhengliang;Yu Xiaoping

作者机构：中国计量大学生命科学学院、浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室杭州310018 

出 版 物：《中国食品学报》 (Journal of Chinese Institute Of Food Science and Technology)

年 卷 期：2024年第24卷第12期

页      面：343-350页

核心收录：

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083203[工学-农产品加工及贮藏工程] 

基　　金：浙江省重点研发项目(2018C02041) 浙江省属高校基本科研业务费专项项目(2022YW82) 

主　　题：微滴式数字PCR 牛肉 鸭源性成分 定量检测 

摘      要：采用微滴式数字PCR(ddPCR)技术建立一种牛肉中鸭源性成分的检测方法。以牛和鸭的单拷贝核基因ACTB为靶基因,合成特异性引物和探针。通过引入一个固定的常数K(转换系数),直接将ddPCR测定的DNA拷贝数转换为肉类的质量分数。根据模拟混合样本中已知的肉质量分数和实际测得的DNA拷贝数之间的关系,计算和验证K值,进而建立牛肉中鸭源性成分的计算公式,并用于牛肉/鸭肉人工模拟混合样本和市售牛肉制品中鸭源性成分的定量检测。结果表明,所建立的ddPCR方法能特异性定量检测牛肉中鸭源性成分,K值为0.16,定量检测公式为M_(D)/M_(B)=0.16×Q_(D)/Q_(B),式中M_(D)和M_(B)分别为鸭肉和牛肉的质量;Q_(D)和Q_(B)分别为鸭和牛ACTB的拷贝数。牛肉中掺杂鸭肉的质量分数在1%~90%范围,该函数均具有较好的线性关系,R^(2)0.99。该定量方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.1%和0.5%。人工模拟混合样本中鸭肉粉质量分数为20%~80%时,检测结果绝对误差均1.0%。16份市售牛肉制品样本中,2份被检出鸭源性成分,含量分别为44.87%和18.21%,与商品标签不符。本研究建立的ddPCR方法具有良好的特异性、灵敏性、准确性和适用性,可实现牛肉中鸭源性成分的定量检测,为我国牛肉及其制品质量安全监管提供技术支撑。