基于鲁米诺增强发光体系的喹乙醇CLEIA技术研究

作     者：王士桢 杨加成 董晓涵 倪云梅 黄雅丽 金仁耀 WANG Shizhen;YANG Jiacheng;DONG Xiaohan;NI Yunmei;HUANG Yali;JIN Renyao

作者机构：浙江工商大学海洋食品研究院/浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室浙江杭州310012 杭州医学院公共卫生学院浙江杭州310013 

出 版 物：《核农学报》 (Journal of Nuclear Agricultural Sciences)

年 卷 期：2025年第39卷第3期

页      面：594-604页

核心收录：

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

主　　题：鲁米诺 喹乙醇 残留检测 化学发光酶免疫分析 

摘      要：为建立高效的喹乙醇化学发光酶免疫检测方法(OLA-CLEIA),本研究以鲁米诺-HRP-H2O2增强体系为发光体系,探究OLA-CLEIA的最佳化学发光条件和免疫反应条件,并采用高效液相色谱法(HPLC)进行验证。结果表明,化学发光的最佳条件为鲁米诺浓度1.0 mmol·L^(-1),H2O2浓度2.0 mmol·L^(-1)、稀释比1500,4-溴苯酚浓度2.0 mmol·L^(-1),4%的二甲基亚砜(DMSO)助溶,三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)缓冲液浓度0.02 mol·L^(-1)、pH值9.0;间接竞争免疫反应的最佳条件为包被抗原浓度0.94μg·mL^(-1),抗体稀释比1∶4800;根据抑制率与喹乙醇浓度得到的线性回归方程为y=17.305 lnx+3.6224,R2=0.9971,检测限(IC10)和灵敏度(IC50)分别为1.45、14.60 ng·mL^(-1);对鱼饲料样品的加标回收率为91.0%~104.0%,批内、批间精密度变异系数均低于6.0%;通过HPLC测得OLA-CLEIA具有较高的准确性与稳定性。综上,本研究建立的OLA-CLEIA具有准确可靠、操作简便、特异性强等优点,可用于多种饲料中喹乙醇的残留检测分析。本研究可为其他小分子残留的CLEIA技术提供参考。