开心散含药血清调节自噬减轻Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的作用研究

作     者：邢瀚文 杨依 印艳萍 谢岚 方芳 XING Han-wen;YANG Yi;YIN Yan-ping;XIE Lan;FANG Fang

作者机构：北京中医药大学中药学院北京102488 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2025年第50卷第2期

页      面：313-321页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81373995) 北京中医药大学研究生自主课题(2018-JYBZZ-XS089) 

主　　题：阿尔茨海默病 开心散 含药血清 Akt/mTOR 自噬 神经保护 

摘      要：研究开心散含药血清对β-淀粉样蛋白片段25~35(Aβ_(25-35))诱导的SH-SY5Y细胞自噬的调节作用。建立25μmol·L^(-1)Aβ_(25-35)损伤SH-SY5Y细胞模型,将不同浓度(5%、8%、10%)开心散含药血清(KXS-MS)加入细胞培养液中共同孵育24 h,采用噻唑兰(MTT)法检测细胞活性,Western blot法检测细胞内自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ及蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的水平。进而将自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和低浓度KXS-MS联合应用,检测上述自噬相关蛋白表达变化。结果显示,Aβ_(25-35)可以引起SH-SY5Y细胞存活率明显降低,细胞中LC3Ⅱ、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平显著升高,p-Akt、p-mTOR、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著下降;与Aβ_(25-35)模型组比较,KXS-MS能明显对抗Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞损伤,提高细胞存活率;可显著降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平,提高p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平。与低浓度KXS-MS比较,Rapa不影响细胞存活率和p-Akt、p-Akt/Akt水平,可显著升高细胞中LC3Ⅱ、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平,显著降低细胞中p-mTOR、p-mTOR/mTOR水平。3-MA可明显降低细胞存活率和p-Akt、p-Akt/Akt水平,但对细胞中LC3Ⅱ、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-mTOR、p-mTOR/mTOR水平无明显影响。以上结果表明,KXS-MS可对抗Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞损伤,可能通过上调Akt/mTOR活性,抑制Aβ_(25-35)诱导的自噬状态,发挥神经细胞保护作用。