青鳉eef1a1l3基因的表达特征及抗体制备

作     者：黄岩 林淑婷 邓菊 梁晶婕 陈天圣 HUANG Yan;LIN Shuting;DENG Ju;LIANG Jingjie;CHEN Tiansheng

作者机构：海水养殖生物育种全国重点实验室集美大学水产学院福建厦门361021 鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心福建厦门361021 

出 版 物：《淡水渔业》 (Freshwater Fisheries)

年 卷 期：2025年第55卷第1期

页      面：60-68页

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：福建省自然科学基金资助项目(2022J05149) 国家自然科学基金资助项目(32273127) 福建省教育厅项目(JAT210233) 

主　　题：青鳉(Oryzias latipes) eef1a1l3基因 多克隆抗体 表达模式 性别分化 

摘      要：青鳉(Oryzias latipes)是研究性别分化和生殖调控的重要模式鱼类,前期通过青鳉性腺转录组发现eef1a1l3 mRNA在卵巢中高表达,而在精巢几乎不表达,推测其参与性别分化和卵巢发育的调控。生物信息学分析显示,Eef1a1l3蛋白在硬骨鱼类中非常保守。为探究eef1a1l3基因的功能,通过半定量PCR(SqRT-PCR)绘制了eef1a1l3基因在不同组织和早期不同发育时期的表达谱。通过抗原选取、原核表达、蛋白纯化以及动物免疫实验获取Eef1a1l3多克隆抗体,并对该抗体进行了特异性的检测以及效价的鉴定。结果显示,eef1a1l3 mRNA在成体组织中仅在卵巢特异表达,在早期胚胎发育阶段呈现母源性表达。制备的Eef1a1l3多克隆抗体与抗原结合的最大稀释倍数为1∶64000,显示出良好的免疫原性,并且Eef1a1l3蛋白在青鳉性腺中的卵巢而非精巢中有表达,这与mRNA表达模式一致。综上,eef1a1l3基因可能是早期胚胎发育和卵巢发育的重要调控因子,并且制备的Eef1a1l3多克隆抗体可以应用于青鳉及其他硬骨鱼类eef1a1l3基因功能的相关研究。