缺氧特异性诱导肺血管内皮细胞黏附分子3表达以促进单核细胞黏附

作     者：孟祥琼 陈婷 谢宏晨 杨诚忠 范旭 谭小玲 MENG Xiangqiong;CHEN Ting;XIE Hongchen;YANG Chengzhong;FAN Xu;TAN Xiaoling

作者机构：陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系寒区医学教研室重庆 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系极端环境医学教育部重点实验室重庆 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系高原生理学与病理学教研室重庆 重庆市妇幼保健院(重庆医科大学附属妇女儿童医院)生殖医学中心重庆 湖北民族大学医学部湖北恩施 

出 版 物：《陆军军医大学学报》 (Journal of Army Medical University)

年 卷 期：2025年第47卷第1期

页      面：51-59页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(32071122) 

主　　题：缺氧 细胞黏附 肺血管内皮细胞 单核细胞 细胞黏附分子3 

摘      要：目的探究细胞黏附分子3(cell adhesion molecular 3,CADM3)在肺血管内皮细胞上的表达特异性,分析其介导单核细胞特异性黏附的作用,探讨缺氧诱导肺血管外周单核细胞浸润的新机制。方法以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)、大鼠肺血管内皮细胞(rat pulmonary vascular endothelial cell,rPEC)和大鼠主动脉内皮细胞(rat aortic endothelial cell,rAEC)为细胞模型,分为常氧(21%O2)对照组和缺氧(1%O2或5%O2)处理组。通过分析缺氧8 h HUVEC的转录组数据,筛选差异表达的CADM3。通过细胞黏附实验、siRNA干扰、免疫细胞化学技术、Western blot技术和流式细胞术,分析CADM3在缺氧HUVEC与单核细胞特异性高黏附中的作用;通过铁螯合剂-去铁胺(deferoxamine,DFX)和shRNA干扰调节HIF-1α表达,分析HIF-1转录活性对CADM3表达的影响。结果缺氧HUVEC中CADM3表达增加,在缺氧6~8 h达到最高,随后下降;靶向CADM3的siRNA转染后,与阴性对照组比较,CADM3的表达降低,缺氧HUVEC和U937细胞的黏附率显著下降,差异具有统计学意义(P0.05)。与常氧(21%O2)溶剂对照组比较,DFX(100μmol/L)处理的HUVEC中HIF-1α及其靶蛋白STC2蛋白水平增加;靶向HIF-1α的shRNA转染后,与阴性对照组比较,HIF-1α及其靶蛋白STC2蛋白水平下降,但CADM3蛋白表达均无变化。缺氧rPEC中CADM3的蛋白水平及其在细胞膜上的分布均增加,与rPEC细胞比较,rAEC细胞中未检测到CADM3的蛋白表达;脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(5μg/mL)处理后,常氧或缺氧培养的rPEC细胞中HIF-1α和CADM3表达均无明显变化。缺氧rPEC与外周血白细胞中CD11b+细胞的黏附比率最高,差异具有统计学意义(P0.01)。抗CADM3抗体孵育后,与Blank组比较,缺氧rPEC与U937细胞的黏附显著下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论缺氧以特异地非HIF-1依赖的方式诱导肺血管内皮细胞中CADM3的表达,促进缺氧诱导的肺血管内皮细胞与单核细胞的特异性黏附。