miR-881-3p对MBMEC增殖和迁移作用的研究

作     者：曹芳 魏勇 吴忧 任静静 齐亚银 CAO Fang;WEI Yong;WU You;REN Jing-jing;QI Ya-yin

作者机构：石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 新疆天润科技股份有限公司新疆乌鲁木齐830063 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第46卷第11期

页      面：1107-1116页

学科分类：090602[农学-预防兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(32460898、31760737) 天山英才“三农骨干人才”项目(2024-97) 石河子大学科技成果转化项目(CGZH202104) 奶牛信息智能化管理技术研究与示范(NYHXGG、2023AA310) 石河子大学高层次人才科研启动项目(RCZK202042) 

主　　题：miR-881-3p 白细胞介素9受体 小鼠脑微血管内皮细胞 细胞增殖 细胞迁移 

摘      要：为探究miR-881-3p对白细胞介素9受体(IL9R)的靶向性及其对小鼠脑微血管内皮细胞(MBMEC)增殖和迁移的调控作用,本研究将MBMEC分为模拟物组(转染miR-881-3p模拟物)、模拟物对照组(转染miR-881-3p模拟物对照物)、抑制剂组(转染miR-881-3p抑制剂)、抑制剂对照组(转染miR-881-3p抑制剂对照物),通过双荧光素酶试验检测miR-881-3p对IL9R的靶向性;采用RT-qPCR检测各组细胞中miR-881-3p、IL9R、增殖细胞核抗原(PCNA)、小型染色体维持蛋白复合体3(MCM3)、紧密连接蛋白-5(Claudin-5)的相对转录水平;采用CCK-8法检测各组细胞增殖水平;采用划痕试验检测各组细胞的迁移情况;通过western blot检测IL9R、PCNA蛋白、MCM3、claudin-5的表达水平。双荧光素酶试验结果显示,miR-881-3p对IL9R具有直接靶向作用。RTqPCR结果显示,转染48 h后,与对照组相比,模拟物组中miR-881-3p的相对转录水平极显著升高(P0.01),而IL9R的相对转录水平极显著降低(P0.01),与抑制剂对照组相比,抑制剂组中miR-881-3p的相对转录水平极显著降低(P0.01),而IL9R的相对转录水平极显著升高(P0.01),与抑制剂组相比,模拟物组中PCNA、MCM3、claudin-5的相对转录水平极显著降低(P0.001)。CCK-8法检测结果显示,miR-881-3p通过负调控IL9R进而抑制MBMEC的增殖。划痕试验结果显示,miR-881-3p通过负调控IL9R进而抑制MBMEC的迁移。Western blot检测结果显示,过表达miR-881-3p后MBMEC中的IL9R、MCM3、claudin-5蛋白表达量极显著降低(P0.001),PCNA蛋白表达量显著降低(P0.05)。上述结果首次证实miR-881-3p通过负调控IL9R抑制MBMEC的增殖和迁移,本研究为探究细菌性脑膜炎损伤机制提供了可靠依据。