快速鉴定格尔德霉素产生菌——吸水链霉菌17997中的洋橄榄叶素

作     者：李书芬 武临专 陈菲菲 王红远 孙桂芝 王以光 Shufen Li;Linzhuan Wu;Feifei Chen;Hongyuan Wang;Guizhi Sun;Yiguang Wang

作者机构：中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室北京100050 中国医药集团四川抗菌素工业研究所成都610052 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2011年第27卷第7期

页      面：1109-1114页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：科技部"重大新药创制"科技重大专项(No.2009ZX09501-008)资助 

主　　题：吸水链霉菌17997 洋橄榄叶素 液相色谱-质谱联用(LC-MS) dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶 格尔德霉素 

摘      要：对格尔德霉素产生菌吸水链霉菌17997的发酵液乙酸乙酯提取物进行了硅胶板TLC初步分离和NaOH溶液喷涂显色,对显红色、具有抗革兰阳性菌活性的条带进行了HPLC分析,提示抗革兰阳性菌活性化合物可能为大环二内酯类抗生素洋橄榄叶素;以dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶(Tgd)基因保守区设计PCR引物,扩增了吸水链霉菌17997基因组DNA中的tgd并进行了序列分析,表明吸水链霉菌17997含有洋橄榄叶素生物合成基因簇中的tgd基因;对NaOH溶液喷涂显红色的化合物进行LC-(+)-ESI-MS分析,证实其为洋橄榄叶素。因此,吸水链霉菌17997产生洋橄榄叶素;同时,建立了一种快速鉴定洋橄榄叶素及其产生菌的方法,主要包括TLC硅胶板分离、NaOH溶液显色、HPLC和LC-MS分析,以及tgd的PCR检测与序列分析。