脑缺血／再灌注介导大鼠海马CA1区nNOS巯基去亚硝基化作用的研究

作     者：杨红宁 燕宪亮 赵宁军 许铁 YANG Hongning;YAN Xianliang;ZHAO Ningjun;XU Tie

作者机构：徐州医学院救援医学研究所徐州医学院附属医院急诊医学实验室江苏徐州221002 

出 版 物：《徐州医学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Xuzhou)

年 卷 期：2014年第34卷第9期

页      面：594-597页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

主　　题：神经型一氧化氮合酶 巯基去亚硝基化 全脑缺血/再灌注 一氧化氮 神经细胞损伤 

摘      要：目的：探讨大鼠全脑缺血/再灌注介导的大鼠海马CA1区神经型一氧化氮合酶（ nNOS）巯基去亚硝基化对神经元损伤的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组（ S组）、脑缺血/再灌注组（ I/R组）、给药组（ GSNO组、7-NI组、MK801组、NS102组、GYKI组）及溶剂对照组（生理盐水组、DMSO组）。采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血/再灌注模型。运用生物素转化法检测蛋白质的巯基-亚硝基化，聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹方法、焦油紫染色方法对nNOS巯基去亚硝基化水平以及大鼠海马神经元细胞的损伤进行研究。结果与S组相比，I/R组nNOS巯基亚硝基化水平明显降低（P0．05）；与I/R组相比，GSNO组、7-NI组以及MK801组nNOS巯基亚硝基化水平显著增高（P0．05），但GYKI组、NS102组、DMSO组以及生理盐水组与I/R组相比，差异无统计学意义。说明外源性一氧化氮（NO）供体GSNO、nNOS抑制剂7-NI、N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体抑制剂MK801能够抑制nNOS的去亚硝基化，对神经元起保护作用。结论大鼠全脑缺血/再灌注所致的大鼠海马CA1区nNOS巯基去亚硝基化在神经细胞损伤中有作用，其去亚硝基化是通过NMDA受体起作用；外源性NO供体GSNO、nNOS抑制剂7-NI也能够抑制nNOS的去亚硝基化从而对神经元起保护作用。