高效抑制O型口蹄疫病毒shRNA分子的筛选与验证

作     者：马铈委 陈创夫 乔军 

作者机构：新疆地方与民族发病教育部重点实验室新疆石河子832003 石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2012年第32卷第1期

页      面：13-17,22页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：转基因生物新品种培育国家重大专项(2009ZX08005-003B) 

主　　题：口蹄疫病毒 RNAi shRNA序列 筛选 

摘      要：针对O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease veirus,FMDV)基因组高度保守的VP1和3D区段,选取了120个干扰靶位,根据RNAi技术原理,构建了包括对照在内的82个shRNA表达质粒;通过细胞攻毒试验,提取细胞毒液RNA,然后RT-PCR,最后real-time PCR检测病毒和shRNA的表达量。结果显示,干扰质粒组基因表达抑制率为63%～96.8%,其中pSiRe-Zs-VP1-54和pSiRe-Zs-3D-12等2个表达质粒抑制效率最好,分别为96.8%和87%,表明这2个表达质粒能够明显抑制FMDV的复制。