龙眼14-3-3基因及其启动子的克隆以及在体胚发生过程中的表达分析

作     者：蔡英卿 赖钟雄 陈义挺 林玉玲 张妙霞 李惠华 CAI Yingqing;LAI Zhongxiong;CHEN Yiting;LIN Yuling;ZHANG Miaoxia;LI Huihua

作者机构：福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建福州350002 福建省泉州师范学院福建泉州362000 

出 版 物：《热带作物学报》 (Chinese Journal of Tropical Crops)

年 卷 期：2011年第32卷第5期

页      面：845-853页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：福建省重大科技平台建设(2008N2001) 国家自然科学基金(31011787/30471204)项目 

主　　题：龙眼胚性愈伤组织 14—3—3基因 克隆 序列分析 实时荧光定量PCR法 

摘      要：分离克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织14-3-3基因,并分析该基因在龙眼体胚发生过程中的表达情况。采用RT-PCR结合RACE法,获得龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的cDNA全长序列和DNA序列,采用TAIL-PCR法,获得龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的启动子DNA序列,运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究该基因在龙眼体胚发生过程中的表达。结果表明:经克隆得到龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因786 bp的cDNA全长序列(GenBank检索号为GU573765),该cDNA开放阅读框推定的氨基酸序列(含261个氨基酸)与其它植物14-3-3具有较高同源性;该基因的DNA序列(GenBank检索号为GU573766)长为1 859 bp,包含3个内含子,内含子的剪切位点均符合真核生物GT-AG规则;该基因的启动子DNA序列(GenBank检索号为GU573766)长为910 bp;该基因在龙眼体胚各阶段均有表达,其中在松散型胚性愈伤组织阶段和心形胚及鱼雷形胚阶段呈现高表达,整个变化趋势呈倒S状。