CTGF siRNA联合电针治疗对大鼠损伤脊髓星形胶质细胞GFAP表达的影响

作     者：柴勇 张敏 杨成 王秀文 刘向勇 Chai Yong;Zhang Min;Yang Cheng;Wang Xiuwen;Liu Xiangyong

作者机构：滨州医学院人体解剖学教研室烟台264003 滨州医学院医学研究中心烟台264003 滨州医学院细胞生物学教研室烟台264003 

出 版 物：《神经解剖学杂志》 (Chinese Journal of Neuroanatomy)

年 卷 期：2011年第27卷第4期

页      面：414-418页

学科分类：1005[医学-中医学] 1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

基　　金：山东省优秀中青年科学家奖励基金(2004BS02017) 山东省自然科学基金(Y2007C034) 

主　　题：脊髓损伤 小干扰RNA CTGF GFAP 电针 大鼠 

摘      要：目的:探讨抗CTGF小干扰RNA(small interferon RNA,siRNA)局部注射联合电针治疗对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为SCI组、CTGF siR-NA干扰(CTGF)组、CTGF siRNA干扰联合电针(EA+CTGF)组。制作大鼠SCI模型,将含有CTGF siRNA/Invivo-fectamine复合物溶液的明胶海绵移植入CTGF组和EA+CTGF组大鼠的脊髓(T10)损伤断端,SCI组用Invivo-fectamine转染试剂代替。EA+CTGF组在模型制备后每天的固定时间给予电针治疗。各组在3 d、7 d、14 d后分别取材,应用免疫荧光组织化学、Western Blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察星形胶质细胞的形态、数量和GFAP、GFAP mRNA表达变化。结果:SCI组星形胶质细胞反应性增生、胞体肥大,损伤边缘区形成GFAP强表达的胶质界膜;CTGF siRNA干预后,GFAP表达减弱,胞体减小,GFAP阳性细胞数减少;EA+CTGF组GFAP免疫反应表达明显降低,损伤边缘区GFAP荧光强度与脊髓其它区域基本相同。Western Blot结果显示:与SCI组相比,CTGF组与EA+CTGF组的GFAP均减少,有统计学意义(P0.05),与CTGF组相比,EA+CTGF组的GFAP减少,有统计学意义(P0.05);RT-PCR电泳结果表明损伤早期EA+CTGF组GFAP mRNA表达明显低于损伤组并有显著性差异(P0.01),变化与Western Blot结果是一致的。结论:SCI后,CTGF siRNA联合电针治疗能有效阻止GFAP表达,使胶质反应减轻,有助于神经功能恢复。