LPS通过p38/MAPK通路和NF-κB的活化诱导RAW264.7细胞HIF-1α的表达

作     者：符智慧 徐凌 黄姣 尹东青 Fu Zhihui Xu Ling Huang Jiao Yin Dongq ing

作者机构：口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆医科大学附属口腔医院修复科重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室重庆400015 

出 版 物：《重庆医科大学学报》 (Journal of Chongqing Medical University)

年 卷 期：2016年第41卷第10期

页      面：1033-1039页

核心收录：

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

基　　金：重庆市教委资助项目(编号:KJ1400234) 

主　　题：脂多糖 低氧 低氧诱导因子-1α RAW264.7细胞 

摘      要：目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)在低氧条件下对RAW264.7细胞低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α)表达的影响及其可能的调控机制,探讨对牙周炎破骨细胞吸收的影响。方法:观察低氧条件下,用1μg/m L LPS刺激RAW264.7细胞,应用Western blot以及q RT-PCR检测HIF-1α的表达和P38/丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)和核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路活化情况。干扰HIF-1α后在低氧中用LPS诱导RAW264.7细胞,ELISA检测炎症因子TNF-α、PGE2、IL-1β以及q RT-PCR检测破骨细胞分化标志基因肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor associated factor 6,Traf6)、活化T细胞核因子c1(nuclear factor of activated Tcells cytoplasmic1,Nfatc1)、组织蛋白酶K(cathepsin K,Ctsk)、c Fos、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,Trap)的变化。结果:低氧条件下LPS诱导RAW264.7细胞3、6、9、12 h分别与1 h比较,HIF-1α表达量明显增加(P=0.000、P=0.000、P=0.000、P=0.000)。在低氧条件下,LPS刺激RAW264.7细胞HIF-1αm RNA的相对表达量水平(0.81±0.14)高于单纯的低氧组(0.21±0.05),2组比较存在统计学差异(P=0.000)。低氧条件下LPS上调了p38的磷酸化水平(P=0.009),抑制p38以及NF-κB的表达明显抑制HIF-1α的表达(P=0.011、P=0.039)。干扰HIF-1α的表达明显抑制了低氧条件下LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2(94.46±8.89)和IL-1β(83.96±7.71)的生成,分别与si RNA-Control组的PGE2(134.66±21.11)和IL-1β(121.34±20.42)比较,2组比较存在统计学差异(P=0.008、P=0.008);同时也抑制了低氧条件下LPS诱导的破骨细胞标志基因Traf6、Nfatc1的m RNA相对表达量(0.50±0.20,0.60±0.30)的表达,分别与si RNA-Control组(1.00±0.00、1.00±0.00)比较(P=0.000、P=0.000)。结论:LPS在低氧条件下通过p38/MAPK通路和NF-κB的活化诱导了RAW264.7细胞HIF-1α表达,干扰HIF-1α的表达能够抑制低氧条件下LPS诱导的炎症因子的生成以及破骨细胞的分化。