基于iPSC诱导分化具有电生理活动心肌细胞方法的研究

作     者：李弘夏 刘涛燕 吴福建 兰峰 LI Hongxia;LIU Taoyan;WU Fujian;LAN Feng

作者机构：首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所血管生物研究室100029 

出 版 物：《心肺血管病杂志》 (Journal of Cardiovascular and Pulmonary Diseases)

年 卷 期：2016年第35卷第11期

页      面：896-899页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：优秀青年科学基金项目(81422003) 国家自然科学基金面上项目(81570215) 

主　　题：诱导多潜能干细胞 分化 心肌细胞 

摘      要：目的:通过诱导多潜能干细胞i PSC体外定向分化为心肌细胞的方法,已经成为干细胞和心血管领域研究的有效工具,也为临床治疗带来新希望。本文依据胚胎发育的分子调控机制,探索建立体外定向分化心肌的方法。方法:使用干细胞培养基培养i PSCs生长至80%,换成含6μmol/L Chir99021和25μg/L Activin A的基础培养基培养48h,基础培养基为含有2%的B27、64μg/L l-ascorbic acid2-phosphate的RPMI 1640培养基,换为含2μM Wnt-C59的WNT信号抑制剂培养基培养48h,最后换为维持培养基继续培养,每两天换液,约第8天可见心肌开始搏动。结果:i PSC在向成熟心肌分化时,显微镜下可观察到明显的肌丝肌节结构,具有心肌特异性标志物TNNT 2,MLC 2a的强阳性表达,并表现出自发跳动的电生理活动。结论:该方法可以成功诱导i PSC高效分化为具有电生理功能的心肌细胞。