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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:北京大学基础医学院生理学与病理生理学系教育部分子心血管学重点实验室北京100191
出 版 物:《北京大学学报(医学版)》 (Journal of Peking University:Health Sciences)
年 卷 期:2016年第48卷第5期
页 面:756-765页
核心收录:
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
基 金:国家基金委重大国际合作项目(81220108004) 国家重点基础研究发展计划(973计划,2012CB518002) 国家自然科学基金(81070243,81121061,91339000) 国家杰出青年基金(81225002)资助
摘 要:目的:观察高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化早期microRNA表达变化,分析其可能参与的信号通路途径。方法:采用高磷(无机磷2.6 mmol/L)刺激大鼠血管平滑肌细胞系A7r5钙化7 d,邻甲酚酞络合酮比色法和考马斯亮蓝法检测细胞内钙含量,RT-PCR法检测平滑肌细胞表型和钙化相关基因的表达变化,茜素红染色观察钙结节。microRNA microarray法检测高磷刺激后0、3、12 h,680种microRNA表达变化。采用TAM软件分析不同时间点间信号激活情况。结果:高磷诱导的A7r5细胞钙盐含量升高9.6倍(P0.05),平滑肌细胞表型mRNA(SM-αactin,SM22)下调(P0.05),钙化相关mRNA(BMP2、MSX2、Runx2)上调(P0.05),茜素红染色后可见高磷刺激组有明显钙结节。680种microRNA在3个时间点的表达各不相同,只有6种microRNA分别逐级上调或渐渐下调。26种信号通路被明显激活,其中包括细胞凋亡、分化增殖等已知与钙化相关的信号通路。结论:microRNA参与调节血管钙化是一种动态微调的过程,为血管钙化研究带来新的思路。