刚毛柽柳液泡膜H^+转运无机焦磷酸酶ThVP3的克隆与表达分析

作     者：张春蕊 王艳敏 张玉 王玉成 杨传平 王超 Zhang Chunrui;Wang Yanmin;Zhang Yu;Wang Yucheng;Yang Chuanping;Wang Chao

作者机构：东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 黑龙江省林业科学研究所哈尔滨150081 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2016年第14卷第10期

页      面：2637-2644页

核心收录：

学科分类：0907[农学-林学] 08[工学] 0829[工学-林业工程] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金(31300571) 黑龙江省科学基金项目(QC2016019)共同资助 

主　　题：刚毛柽柳 液泡膜H+转运无机焦磷酸酶 胁迫响应 基因表达 

摘      要：通过对刚毛柽柳转录组的分析,获得并克隆了1个H^+-PPase基因cDNA全长,命名为ThVP3。序列分析结果表明:ThVP3全长3 500 bp,包含2 406 bp完整的开放读码框,618的5 非编码区和476 bp的3 非编码区。该cDNA编码1个801个氨基酸的多肽,等电点为5.67,推测分子质量为84.86 k D。通过与其他物种的氨基酸多序列比对及系统进化树分析,发现ThVP3氨基酸序列与AtVP2(拟南芥)一致性达88%,属于Ⅱ型VP成员。ThVP3基因有15个跨膜区,并具有高度保守的3个结构域(CS1,CS2,CS3)。相对荧光定量RT-PCR结果表明,ThVP3在高盐及干旱胁迫下均呈现为表达上调,但在各胁迫时间点和不同组织中的表达模式有所差异,0.4 mol/L Na Cl胁迫处理下,地下部分3 h达到最大值后有不同程度的降低,地上部分24 h达到最大值,与地下部分比,地上部分呈现较高的表达量;20%(w/v)PEG 6000胁迫处理下,地下部分在3 h和12 h达到峰值,地上部分表达量逐渐升高,24 h达到最大值后逐渐降低,96 h达到第2个峰值。ThVP3的表达受盐旱胁迫的诱导,推测其可能在柽柳的胁迫应答中起着重要的作用。