禽弱毒疫苗中REV低剂量污染检测方法的比较

作     者：任志浩 栾怀彪 李阳 王一新 崔治中 常爽 赵鹏 REN Zhi-hao;LUAN Huai-biao;LI Yang;WANG Yi-xin;CUI Zhi-zhong;CHANG Shuang;ZHAO Peng

作者机构：山东农业大学动物医学院山东泰安271018 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2017年第37卷第6期

页      面：1041-1045页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主　　题：禽网状内皮组织增生症病毒 污染 Real-Time RT-PCR 核酸斑点杂交 

摘      要：使用污染有禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的弱毒疫苗是REV感染途径之一,而通常弱毒疫苗中REV的污染剂量较低,难以检测,本研究对不同方法在检测弱毒疫苗中REV低剂量污染进行了比较研究。将定量好的REV以不同剂量分别人为污染一批商品化新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗,提取核酸后分别以TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测、常规RT-PCR检测以及PCR产物结合核酸斑点杂交检测等不同方法进行检测。结果显示常规RTPCR检测仅可检测到10TCID50/羽份的REV污染,而另外两种方法均检测到1TCID50/羽份的低剂量REV污染。将人为污染1TCID50/羽份和2TCID50/羽份REV的NDV弱毒疫苗各接种10只SPF鸡,定期针对REV抗体及其核酸进行检测,结果显示在免疫污染疫苗后7周内REV抗体全部为阴性,而核酸检测均可以检测到一定比例的阳性,提示通过接种SPF鸡检测弱毒疫苗中REV污染时,仅仅通过抗体判定可能会对一些剂量较低的REV污染造成漏检,通过结合对病原的检测有助于降低漏检率。