细菌回复突变试验标准菌株分子质控方法的研究

作     者：徐潇 石继春 梁丽 孙文媛 杨越 叶强 XU Xiao;SHI Ji-chun;LIANG Li;SUN Wen-yuan;YANG Yue;YE Qiang

作者机构：中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室中国医学细菌保藏管理中心北京102629 

出 版 物：《微生物学免疫学进展》 (Progress In Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2017年第45卷第6期

页      面：38-45页

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：基金项目:国家微生物资源平台医学微生物资源子平台运行与服务(NIMR-2017-2) 

主　　题：细菌回复突变试验 标准菌株 分子生物学方法 质量控制 

摘      要：目的建立细菌回复突变试验标准菌株的分子生物学质量控制(质控)方法。方法使用分子生物学方法(16s rDNA、种属特异性鉴定PCR、组氨酸操纵子关键突变位点序列分析、凝胶电泳和多位点序列分析方法)鉴定细菌回复突变试验标准菌株,并与传统生物学特性的质控方法进行比对。结果细菌回复突变试验标准菌株的生物学特性结果符合标准要求;16S rDNA序列比对为沙门菌,且种属特异性扩增结果为鼠伤寒沙门菌;标准菌株均具有组氨酸操纵子区原始构建的突变位点;脉冲场凝胶电泳带型均不一致,最低相似度为82%;多位点序列分析可分为ST19和ST3438两个ST型。结论建立了细菌回复突变试验标准菌株的分子生物学质控方法,该方法具有操作性强和重复性好等特点,与传统生物学特征方法具有很好的一致性,特别是针对相应his基因突变位点的检测手段,确保了细菌回复突变试验标准菌株检测的遗传稳定性和准确性。