同时检测水禽3种常见病原菌的环介导间接PCR方法的建立

作     者：程龙飞 傅光华 林群群 刘荣昌 陈翠腾 傅秋玲 万春和 施少华 陈红梅 黄瑜 CHENG Long-fei;FU Guang-hua;LIN Qun-qun;LIU Rong-chang;CHEN Cui-teng;FU Qiu-ling;WAN Chun-he;SHI Shao-hua;CHEN Hong-mei;HUANG Yu

作者机构：福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 福建省禽病防治重点实验室福建福州350013 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2018年第38卷第1期

页      面：96-99页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(CARS-43) 福建省属公益类资助项目(2015R1023-2) 福建省畜禽疫病防控技术重大研发平台资助项目(2014N2003) 

主　　题：大肠杆菌 多杀性巴氏杆菌 鸭疫里默氏菌 环介导间接PCR 

摘      要：为建立同时检测大肠杆菌、禽源多杀性巴氏杆菌和鸭疫里默氏菌等水禽常见病原菌的环介导间接PCR方法，根据大肠杆菌的gapA基因、禽源多杀性巴氏杆菌的KMTl基因、鸭疫里默氏菌的OmpA基因序列，分别设计引物、标记于猪线粒体基因片段的两端，制备不同细菌的捕获探针；将捕获探针与待检测菌的基因组杂交、补平缺口、环化。采用1对引物反向扩增捕获探针，建立检测水禽3种常见病原菌的环介导间接PCR方法，扩增片段大小分别为328，422和504bp。沙门菌、金黄色葡萄球菌、小鹅瘟病毒的检测结果为阴性。该方法能检测出100Pg的细菌基因组DNA，与常规PCR的符合性为]00％。该方法可用于水禽3种常见病原菌的同时检测，是一种特异性好、灵敏度高的快速病原学诊断方法。