拟南芥抗病相关基因T1N6_22互作蛋白的酵母双杂交鉴定

作     者：赵亚婷 邢红侠 庞茜 郑旭 张靖 瓮巧云 邢继红 董金皋 ZHAO Yating;XING Hongxia;PANG Xi;ZHENG Xu;ZHANG Jing;WENG Qiaoyun;XING Jihong;DONG Jingao

作者机构：河北省植物生理与分子病理学重点实验室河北农业大学真菌毒素与植物分子病理学实验室河北保定071001 河北北方学院农林科技学院河北张家口075000 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2018年第33卷第2期

页      面：1-7页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0903[农学-农业资源与环境] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：河北省自然科学基金项目(C2014405010) 2017年大学生创新创业训练计划项目(201710086012) 

主　　题：拟南芥 T1N6_22 酵母双杂交 互作蛋白 

摘      要：利用酵母双杂交技术,鉴定拟南芥抗病相关基因T1N6-22的互作蛋白,为进一步明确T1N6-22基因调控拟南芥抗病的分子机制奠定基础。利用Gateway技术,构建T1N6-22基因及其候选互作蛋白基因的酵母双杂交载体AD-T1N6-22、AD-AT1G06050、AD-AT1G21400、AD-AT2G19480、BD-T1N6-22、BD-AT1G06050、BD-AT1G21400和BD-AT2G19480。将空载的AD载体分别与BD-T1N6-22、BD-AT1G06050、BD-AT1G21400和BD-AT2G19480载体组合共同转化酵母感受态细胞,检测各基因的自激活活性,发现T1N6-22、AT1G21400、AT2G19480基因无自激活活性,AT1G06050基因有自激活活性。将AD-T1N6-22载体分别与BD-AT1G06050、BD-AT1G21400和BD-AT2G19480载体组合,BD-T1N6-22载体分别与AD-AT1G06050、AD-AT1G21400、AD-AT2G19480载体组合,进行酵母双杂交试验。结果发现,AD-T1N6-22与BD-AT1G06050、BD-AT1G21400和BD-AT2G19480,BD-T1N6-22与AD-AT1G06050、AD-AT1G21400、AD-AT2G19480共转化的酵母细胞在二缺(-Leu/-Trp)、三缺(-Leu/-Trp/-His)和四缺(-Leu/-Trp/-His/-Ade)培养基上均可以生长,表明T1N6-22与AT1G06050、AT1G21400和AT2G19480在酵母细胞中直接互作。