阿尔采末病Aβ多肽基因的高效表达及纯化研究

作     者：杜洪震 赵雪梅 潘杨杏 张冀民 梁平 

作者机构：中国医学科学院.协和医科大学基础医学研究所病理室北京100005 美国哈佛大学医学院神经疾病研究中心 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2004年第20卷第6期

页      面：644-647页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主　　题：阿尔采末病 Aβ多肽 基因表达 亲和层析 

摘      要：目的 通过对Aβ多肽基因进行重组克隆 ,构建质粒和高效表达的菌株 ,并研究表达产物快速高效的纯化回收方法。方法 采用IMPACT TWIN表达系统构建Intein Aβ重组基因表达质粒 ,将该质粒转化至BL2 1(DE3) ,筛选高效表达菌株 ;表达产物经ChitinBeads亲和层析柱分离纯化 ;SDS PAGE电泳 ,毛细管区带电泳及免疫印迹法等鉴定。结果 重组的Intein Aβ基因在BL2 1中获得高效表达 ,筛选出稳定高效表达的BL2 1(DE3)细胞株 ;融合蛋白表达量可达全菌蛋白的 6 0 % ;表达产物经ChitinBeads亲和层析纯化后 ,其纯度可达 98%以上 ,并具有与Aβ多肽相同的分子量及免疫学活性。结论 Aβ多肽基因在IMPACT TWIN系统中可获得高效表达 ,利用ChitinBeads亲和层析方法可将表达的Aβ多肽进行快速、简便、无酶化的高效分离纯化。