丹酚酸C对MPP^+损伤的SH-SY5Y细胞氧化应激和凋亡的抑制作用

作     者：宋俊科 张雯 张雪 杨海光 周启蒙 王金华 杜冠华 SONG Jun-ke;ZHANG Wen;ZHANG Xue;YANG Hai-guang;ZHOU Qi-meng;WANG Jin-hua;DU Guan-hua

作者机构：中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室药物靶点研究与新药筛选北京市重点实验室北京100050 

出 版 物：《中国药理学与毒理学杂志》 (Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology)

年 卷 期：2018年第32卷第5期

页      面：392-399页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81603100) 中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2017-I2M-1-010) 

主　　题：丹酚酸C SH-SY5Y细胞 活性氧 细胞凋亡 

摘      要：目的研究丹酚酸C对MPP^+诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。方法 SH-SY5Y细胞与丹酚酸C(0.1,1.0和5.0μmol·L^(-1))或阳性药N-乙酰半胱氨酸(NAC)5 mmol·L^(-1)孵育2 h后加入MPP^+500μmol·L^(-1),继续培养24 h。MTT法检测细胞存活率,AO/EB染色观察细胞形态及凋亡,应用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,线粒体超氧化物指示剂(Mito SOX)特异性探针检测线粒体超氧化物水平,JC-1检测线粒体膜电位,免疫荧光法测定NADPH氧化酶2(NOX2)的表达,免疫荧光和Western蛋白质印迹法检测细胞色素c,Bcl-2,Bax和活化的胱天蛋白酶3的表达水平。结果 MPP^+500μmol·L^(-1)损伤导致细胞存活率显著降低(P0.01),丹酚酸C(1.0和5.0μmol·L^(-1))及NAC(5 mmol·L^(-1))能够逆转MPP^+损伤,显著提高细胞存活率(P0.05,P0.01,P0.01)。丹酚酸C(1.0和5.0μmol·L^(-1))能够显著减少MPP^+诱导的细胞总ROS增加(P0.01),维持Bax/Bcl-2表达平衡(P0.01),减缓线粒体膜电位降低(P0.05,P0.01),减少细胞色素c的释放(P0.01)及胱天蛋白酶3的活化(P0.05,P0.01)。同时,丹酚酸C(0.1,1.0和5.0μmol·L^(-1))能够明显抑制NOX2的表达(P0.01),降低线粒体内超氧化物水平(P0.01),改善MPP^+引起的细胞氧化应激状态。结论丹酚酸C能够抑制MPP^+诱发的SH-SY5Y细胞氧化应激及其介导的细胞凋亡。