两种人粒酶B嵌合基因的表达及对肿瘤细胞的杀伤作用

作     者：赵晶 王智 贾林涛 张立红 金明 王成济 杨安钢 

作者机构：第四军医大学生物化学与分子生物学教研室西安710032 第四军医大学免疫学教研室西安710032 

出 版 物：《中国生物化学与分子生物学报》 (CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY)

年 卷 期：2004年第20卷第5期

页      面：637-642页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)(2001AA217101) 国家自然科学基金(39925036) 军队医药卫生科研项目(01Z090) 

主　　题：粒酶B 嵌合蛋白 转位 肿瘤杀伤 

摘      要：通过重组PCR构建了抗HER2单链抗体基因、绿脓杆菌外毒素(PE)转位肽序列和活性型粒酶B(GrBa)基因相融合的sFv23e-PEⅡ-GrBa基因,以及N端包含PE部分转位肽序列的PEⅡ-GrBa基因.将这2种粒酶B嵌合蛋白基因瞬时转染或稳定转染HeLa细胞及SKBR-3细胞.通过间接免疫荧光、细胞计数、MTT、ELISA等方法,观察到细胞浆中表达的PEⅡ-GrBa蛋白直接杀伤其表达细胞;而sFv23e-PEⅡ-GrBa表达后被分泌至细胞外,对产生它的细胞没有杀伤性,但能够特异识别并杀伤HER2阳性肿瘤细胞.结果表明,抗肿瘤表面抗原的抗体能够介导靶向识别,转位结构域可以辅助效应分子活化、转位至细胞液并杀伤细胞,为肿瘤的靶向治疗提供了新的策略.