异位hCGβ-CTP37基因疫苗的抗肿瘤作用

作     者：王立新 关庆东 吴瑾 储以微 熊思东 

作者机构：复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032 

出 版 物：《中国癌症杂志》 (CHINA ONCOLOGY)

年 卷 期：2003年第13卷第3期

页      面：193-196页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(39925031) 国家重点基础研究发展计划(973计划)(2001CB510006) 

主　　题：人绒毛膜促性腺激素 基因免疫 肿瘤生物治疗 

摘      要：目的:研究异位hCGβ-CTP37基因免疫诱导的肿瘤特异性免疫应答及其抗肿瘤作用,为肿瘤的免疫生物治疗寻求新途径.方法:分离获取异位hCGβ-CTP37的编码基因,并将4拷贝基因以头尾串联形式克隆于真核表达载体TR421构建重组质粒TR421-CTP37.4,以PCR、酶切和DNA序列测定进行鉴定;肌内注射法对BALB/c小鼠实施3次基因免疫(100μg/100μl)(每只小鼠),间隔3周,并以空载质粒为对照.ELISA法检测免疫小鼠血清中特异性抗hCGβ-IgG抗体;免疫小鼠脾细胞经特异性抗原hCGβ刺激后,用3H-TdR掺入法和同位素释放法分别检测其特异性淋巴细胞增殖活性和CTL细胞毒活性;皮下接种SP2/0-hCGβ细胞攻击免疫小鼠,以成瘤率及实体瘤重量评估体内抗瘤效果.结果:TR421-CTP37.4质粒免疫小鼠产生了较高水平的抗hCGβ-IgG抗体,与空载质粒组有显著差异;hCGβ蛋白刺激TR421-CTP37.4质粒免疫小鼠脾细胞生产了高水平的特异性淋巴细胞增殖活性,且明显高于空载质粒免疫小鼠;特异抗原诱导的TR421-CTP37.4质粒免疫小鼠脾细胞对SP2/0-hCGβ细胞的CTL活性明显高于SP2/0-preS2/S细胞(P0.01);空质粒免疫小鼠接种SP2/0-hCGβ细胞后成瘤率为100%,瘤重达3.37g,而TR421-CTP37.4质粒免疫小鼠的成瘤率为66.7%,瘤重为0.61g,两组比较有显著差异(P0.01).结论:异位hCGβ-CTP37基因免疫所诱导的特异性免疫应答具有抗肿瘤作用,为肿瘤的基因免疫生物治疗提供新的途径.