一种抗TNFα单抗不同粒径级别蛋白聚体监测结果的比较与评价

作     者：郭莎 张峰 刘春雨 于传飞 李萌 王文波 付志浩 俞小娟 王兰 Guo Sha;Zhang Feng;Liu Chunyu;Yu Chuanfei;Li Meng;Wang Wenbo;Fu Zhihao;Yu Xiaojuan;Wang Lan

作者机构：中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室北京100050 

出 版 物：《中国药事》 (Chinese Pharmaceutical Affairs)

年 卷 期：2018年第32卷第8期

页      面：1073-1078页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家科技重大专项重大新药创制自身免疫疾病治疗的单抗类生物类似药质量评价和国家标准品建立(编号2018ZX09736008-006) 

主　　题：单克隆抗体 稳定性研究 蛋白聚体 分子排阻高效液相色谱法 微流数字成像技术 

摘      要：目的:探讨在单克隆抗体(单抗)稳定性研究中,分子排阻高效液相色谱法(size exclusion-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)、微流数字成像(microflow digital imaging,MDI)技术、澄清度及可见异物检查在不同粒径级别蛋白聚体监测中的交互作用。方法:分别采用SEC-HPLC、MDI、澄清度及可见异物检查研究肿瘤坏死因子α(TNFα)靶点单抗在4℃储存6个月、37℃和6000 lx光照条件下储存28 d后,蛋白聚体、不溶性微粒、澄清度及可见异物的不同变化。结果:SEC-HPLC结果表明,与样品在4℃储存6个月的结果相比,抗TNFα单抗的蛋白聚体含量在37℃和6000 lx照度处理28d后均增加均不明显。使用MDI技术可见,抗TNFα单抗经37℃和6000 lx照度处理28 d后,1~10μm、10μm以上、25μm及以上粒径的微粒数量比在4℃储存6个月的样品有明显增多,且增多的微粒主要为蛋白聚体。通过目视法对样品的澄清度和可见异物检查发现,37℃储存和6000 lx照度处理28 d后的抗TNFα单抗澄清度低于4℃储存的样品;各储存条件下的抗TNFα单抗均未检出可见异物。结论:在单抗稳定性研究中,纳米级、微米级蛋白聚体的形成上并不具有一致性,因此,应采用多种方法对蛋白聚集情况进行表征和分析,避免单一方法的局限。