华法林相关维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1及细胞色素P450 2C9基因型快速检测的方法研究

作     者：李杰 刘双 郭伟 陈勇 高元明 LI Jie;LIU Shuang;GUO Wei;CHEN Yong;GAO Yuan-ming

作者机构：首都医科大学附属北京安贞医院呼吸科北京市心肺血管疾病研究所100029 

出 版 物：《中国医药》 (China Medicine)

年 卷 期：2013年第8卷第4期

页      面：472-474页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：北京市科技计划课题(Z101107050210044) 

主　　题：荧光聚合酶链反应 维生素K环氧化物还原酶 细胞色素P450 2C9 

摘      要：目的建立一种快速、准确、简便、经济的检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1（VKORC1）和细胞色素P450 2C9（CYP2C9）基因型的方法。方法提取220例肺栓塞患者外周血的DNA，针对2个基因的SNP位点设计特异性引物，并进行荧光聚合酶链反应（PCR），根据荧光PCR的熔解曲线分析样本的基因型。同时对样本进行传统的限制性酶切片段长度多态性（PCR—RFLP）基因分型，从时间、通量、费用、准确性等方面对2种方法进行比较。结果VKORC1 1693G〉A和CYP2C91 075A〉C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型。220例样本中，VKORC1基因AA型184例，AG型34例，GG型2例，各占83．6％、15．5％、0．9％；CYP2C9基因＊1／＊1型加1例，＊1／＊3型19例，各占91．4，％、8．6％，无＊3／＊3型纯合子。PCR-RFLP检测结果与上述结果基本相同。2种方法相比，前者较后者操作步骤少，用时少，费用相当，结果更准确。结论利用荧光PCR检测VKORC1及CYP2C9的SNP分型操作简便、快速、经济、准确，适用于临床实验室开展基因分型。