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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:深圳出入境检验检疫局广东深圳518001 深圳市检验检疫科学研究院深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室广东深圳518045
出 版 物:《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)
年 卷 期:2016年第27卷第1期
页 面:106-109页
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
主 题:工程土壤 细菌多样性 末端限制性片段长度多态性
摘 要:目的:建立一种高效的末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)方法,检测工程土壤细菌。方法:以深圳和香港两地不同土层(0.5,10,20和30 m)的工程土壤为研究对象,提取并纯化总DNA,利用细菌16S r DNA基因通用引物8f-FAM/1492r进行PCR扩增,扩增产物分别用HhaⅠ、HaeⅢ和MspⅠ限制性内切酶酶切,酶切产物经毛细管电泳测序,序列上传至数据库进行分析。结果:经过比对分析,香港段土壤中大约存在细菌141属,235种;深圳段大约存在132属,206种;32个细菌种属只在香港土壤中有分布,3个细菌种属只在深圳土壤中有分布;植物病原细菌有14个种属。结论:建立的T-RFLP方法能够高效、快速地分析工程土壤细菌。